[發明專利]一種活性益生菌凍干粉及其制備方法

在審

• 申請號: 201611220998.1
• 申請日: 2016-12-26
• 公開（公告）號: CN107043715A
• 公開（公告）日: 2017-08-15
• 發明（設計）人: 晏衛東
• 申請（專利權）人: 山東奧博森醫藥科技有限公司
• 主分類號: C12N1/20
• 分類號: C12N1/20;A23L2/38;C12R1/25;C12R1/23;C12R1/225;C12R1/01
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技術領域

本發明涉及生物技術中的微生物學科領域，具體涉及一種活性益生菌凍干粉，同時涉及其制備方法。

背景技術

隨著人們生活水平的提高，對健康的要求越來越高，益生菌普遍的被接受并廣泛使用。益生菌是一類對宿主有益的活性微生物，是定植于人體腸道、生殖系統內，能產生確切健康功效從而改善宿主微生態平衡、發揮有益作用的活性有益微生物的總稱。益生菌的概念在1989年被提出，2002年科學家確定益生菌的概念和療效。之后短短十年世界人類衛生領域發生了巨大的變化，益生菌益生元的研究和產品開發成為了潮流。該領域的研發、生產，目前在乳酸菌、雙歧桿菌的研究和應用方面尤其突出。這方面的產品有傳統的酸奶，以及新開發的各種酸奶，乳酸飲料，各種單復合菌保健品、食品，還有用于治療腸道疾病的益生菌制劑。因為益生菌的保存條件苛刻，現有產品普遍存在著活菌易死亡，菌數不穩定，導致益生菌產品保質期短，質量不穩定的技術問題。

發明內容

為了解決現有技術發酵活菌數太少、發酵時間太長，產品周期過長的技術問題，本發明提供了一種菌種培養條件不苛刻，發酵性能穩定，發酵過程設備投資小，而且培養基簡單，便宜，易獲得，用量很少，幾乎不產生廢料且活菌數穩定的益生菌飲料配方。

本發明的提供的活性益生菌凍干粉由以下制備方法制備而成：

1）培養基制備

培養基材料準備：

20g葡萄糖、10g蛋白胨、10g牛肉膏、5g酵母膏，加少量熱水完全溶解，備用；

乳酸菌培養基增效劑準備：

稱取檸檬酸氫二銨2g 、無水硫酸鎂 0.58g、硫酸錳 0.25g、Tween-80 1mL、無水乙酸鈉 5g、磷酸氫二鉀2g，混合，備用；

培養用水：自來水經直飲機超濾后無菌水；

將乳酸菌培養基增效劑加入到培養基材料中攪拌溶解，將培養基移入1L的錐形瓶中加入培養用水至1L，0.1 MPa， 121℃滅菌30min，然后冷卻至室溫備用；

2）菌種活化培養

將植物乳桿菌、嗜酸乳桿菌、干酪乳桿菌和乳雙歧桿菌四個菌種分別接種到四個斜面MRS培養基上，在培養箱中37℃，24小時，得到擴大培養所需的菌種；

3）擴大培養

用步驟1）制備好的冷卻至室溫的培養基，在無菌條件下等量接種四個菌種，搖勻后放置于培養箱中，37℃，靜止發酵24小時；

4） 生產發酵

制備發酵培養基，轉入100L的發酵罐中，以體積1%的量接擴大培養后的菌種，攪拌均勻，控制發酵溫度37℃，16-24小時，pH降到4.1-4.5，即可終止發酵；

所述發酵培養基的材料及配比為：糖蜜1.74份、酵母膏1.26份、大豆蛋白胨0.6份；

5）沉淀過濾

步驟4)制備的發酵液，在靜止沉淀的狀態下，吸取上清液，棄置沉淀渣滓，上清液用550目的過濾器，過濾，得到透明、澄清的最后乳酸飲料；

6）用低溫真空冷凍干燥機凍干制得凍干粉。

以上四種菌的凍干粉經稀釋至原發酵液濃度時，活菌總含量不低于9.21×10⁹cfu/ml。

本發明采用上述技術解決方案所能達到的有益效果是：

1、本發明設計了一個含有植物乳桿菌、嗜酸乳桿菌、干酪乳桿菌和乳雙歧桿菌四個菌株的保健飲料配方，并設計了一套制作工藝，以三級靜態深層液體發酵、每級發酵16-24小時，發酵溫度37℃，最后一級發酵所得菌液經沉淀過濾即可包裝成產品，該加工工藝操作簡便。生產的產品為凍干粉，略有發酵味，PH為4.1-4.5，保質期不低于兩年，此凍干粉經稀釋至原發酵液濃度時，保質期內活菌總數不低于9.21×10⁹cfu/ml；

2、本發明選擇的四個菌種，培養條件要求不苛刻，培養溫度比較溫和，且能有效繁殖；發酵性能穩定，在擴大培養的菌液中能連續10個月持續發酵產酸，其性能都沒有明顯衰減、活菌數沒有明顯的降低；

3、生產用培養基，簡單、便宜、容易獲得，有部分培養基甚至是工業廢料的在利用，用量很少，幾乎沒有廢料產生；

4、發酵過稱采用發酵罐、深層、靜止發酵、不需要攪拌，此工藝過程特點，使得過程設備投資較小，無需增加電機等動力攪拌裝置，能在室溫下保存兩年，而同類產品卻要求2-6℃低溫條件保存，且保質期僅為一年半；

5、本發明中的三級發酵，每級發酵時間為16-24小時，相比于目前存在的多數乳酸菌發酵時間大大降低，縮短了產品周期。

具體實施方式