[發明專利]一種檢測飼料中多種脂溶性維生素的方法

有效

• 申請號: 201611219813.5
• 申請日: 2016-12-26
• 公開（公告）號: CN106770769B
• 公開（公告）日: 2019-10-18
• 發明（設計）人: 朱正鵬;梁玉樹;何開蓉;易錫斌;張遨然;汪春霞;王虎;周麗;黃李蓉;梁秋菊
• 申請（專利權）人: 新希望六和股份有限公司;四川新希望畜牧科技有限公司
• 主分類號: G01N30/02
• 分類號: G01N30/02;G01N30/06
• 代理公司: 四川力久律師事務所 51221
• 代理人: 王蕓;熊曉果

1.一種檢測飼料中多種脂溶性維生素的方法，包括以下步驟：

（1）制備多種維生素標準溶液，包括以下維生素中的至少兩種以上：維生素A醋酸酯、維生素D₃、維生素E乙酸酯；

采用HPLC-MS/MS檢測標準溶液，得到標準曲線方程；

色譜條件如下：

色譜柱：C18柱；所述C18柱是：ADME pH 2-10 3μm 2.1 mm I.D.×150mm柱；

流動相包括流動相A：甲醇水溶液相，和流動相B：甲酸水溶液相；

其中流動相A：甲醇水溶液中甲醇的體積比例大于95%，流動相B：甲酸水溶液中甲酸的含量低于1wt%；

采用梯度洗脫，梯度條件：0~2min，流動相A 50~100%；2~9min，流動相A 100%；9~9.5min，流動相A 100~50%；

質譜條件為，ESI正離子掃描模式：多反應監測參數：干燥氣溫度325℃，干燥氣流速11L/min，霧化氣壓力45psi，鞘氣溫度300℃，流速9L/min，毛細管電壓4000V，噴嘴電壓500V；

（2）稱取樣品，到棕色容量瓶中，加入提取溶液超聲提取10-30min，冷卻定容，離心，用0.22μm有機相濾膜，過濾上機，采用與步驟（1）相同的色譜參數和質譜檢測參數進行分析測試；

所述提取溶液是，由提取溶液第一組分和提取溶液第二組分按照25-35：65-75體積比例混合配制而成的溶液；

所述提取溶液第一組分是0.03-0.07% 氨水溶液；

所述提取溶液第二組分是0.1-0.3% BHT甲醇溶液；

（3）根據步驟（ 1） 和步驟（ 2） 的檢測結果計算得出樣品中的多種維生素的含量。

2.如權利要求1所述檢測飼料中多種脂溶性維生素的方法，其特征在于，標準溶液制備：先用甲醇溶解維生素，配制成質量濃度為1g/L的標準物質儲備溶液，然后稀釋成分標準工作溶液。

3.如權利要求2所述檢測飼料中多種脂溶性維生素的方法，其特征在于，標準儲備溶液中加入0.2wt%BHT。

4.如權利要求2所述檢測飼料中多種脂溶性維生素的方法，其特征在于，稀釋過程中應用的是提取溶液進行稀釋。

5.如權利要求1所述檢測飼料中多種脂溶性維生素的方法，其特征在于，所述提取溶液第一組份是：0.05%氨水溶液；所述提取溶液第二組分是：0.2% BHT甲醇。

6.如權利要求5所述檢測飼料中多種脂溶性維生素的方法，其特征在于，提取溶液第一組份和提取溶液第二組分的體積比為30：70。

7.如權利要求1所述檢測飼料中多種脂溶性維生素的方法，其特征在于，采用梯度洗脫過程中，流動相是：流動相A：含0.01-0.03%氨水的96-99%甲醇水溶液，流動相B ：0.01-0.03%甲酸水溶液。

8.如權利要求7所述檢測飼料中多種脂溶性維生素的方法，其特征在于，梯度洗脫程序為：流動相A：含0.02%氨水的98%甲醇水溶液，流動相B ：0.02%甲酸水溶液，流速為0.3mL/min。