[發(fā)明專利]促進土黨參離體增殖的套盒和方法有效
| 申請?zhí)枺?/td> | 201611219707.7 | 申請日: | 2016-12-26 |
| 公開(公告)號: | CN106804426B | 公開(公告)日: | 2019-07-30 |
| 發(fā)明(設(shè)計)人: | 胡秀;馮敏;許炳強;梁韓枝;其他發(fā)明人請求不公開姓名 | 申請(專利權(quán))人: | 中國科學(xué)院華南植物園 |
| 主分類號: | C12N5/04 | 分類號: | C12N5/04;A01H4/00;A01G24/10;A01G24/28;A01G22/25 |
| 代理公司: | 廣州三環(huán)專利商標代理有限公司 44202 | 代理人: | 宋靜娜;郝傳鑫 |
| 地址: | 510000 廣*** | 國省代碼: | 廣東;44 |
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| 摘要: | |||
| 搜索關(guān)鍵詞: | 促進 土黨參 增殖 方法 | ||
1.一種促進土黨參離體增殖的套盒,其特征在于,所述套盒包含以下組分:用以誘導(dǎo)出帶不定芽塊的莖段的培養(yǎng)基1和用以反復(fù)繼代培養(yǎng)培養(yǎng)基2,所述培養(yǎng)基1由MS培養(yǎng)液、0.4~0.6mg/L的6-芐基氨基嘌呤、0.01~0.1mg/L的噻苯隆、25~35g/L的蔗糖以及6.5~7.5g/L的瓊脂組成;
所述培養(yǎng)基2由MS培養(yǎng)液、0.4~0.6mg/L的6-芐基氨基嘌呤、0.01~0.02mg/L的噻苯隆、25~35g/L的蔗糖以及6.5~7.5g/L的瓊脂組成;
用以繼代和壯苗的培養(yǎng)基3,所述培養(yǎng)基3由MS培養(yǎng)液、0.5~1.0mg/L的6-芐基氨基嘌呤、0.05~0.1mg/L的萘乙酸、25~35g/L的蔗糖以及6.5~7.5g/L的瓊脂組成;
用于生根的培養(yǎng)基4,所述培養(yǎng)基4由MS培養(yǎng)液、25~35g/L的蔗糖以及6.5~7.5g/L的瓊脂組成;以及
100~300mg/L的吲哚丁酸。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的套盒,其特征在于,所述培養(yǎng)基1由MS培養(yǎng)液、0.5mg/L的6-芐基氨基嘌呤、0.1mg/L的噻苯隆、30g/L的蔗糖以及7g/L的瓊脂組成;
所述培養(yǎng)基2由MS培養(yǎng)液、0.5mg/L的6-芐基氨基嘌呤、0.01mg/L的噻苯隆、30g/L的蔗糖以及7g/L的瓊脂組成;
所述培養(yǎng)基3由MS培養(yǎng)液、1mg/L的6-芐基氨基嘌呤、0.1mg/L的萘乙酸、30g/L的蔗糖以及7g/L的瓊脂組成;
所述培養(yǎng)基4由MS培養(yǎng)液、30g/L的蔗糖以及7g/L的瓊脂組成;
所述吲哚丁酸溶液的濃度為300mg/L。
3.根據(jù)權(quán)利要求1所述的套盒,其特征在于,所述套盒還包含用以誘導(dǎo)無菌苗的初代培養(yǎng)基,所述初代培養(yǎng)基包含以下組分:MS培養(yǎng)液、25~35g/L的蔗糖以及6.5~7.5g/L的瓊脂。
4.根據(jù)權(quán)利要求1所述的套盒,其特征在于,所述套盒還包含基質(zhì),所述基質(zhì)包含以下重量比的組分:3份黃泥、2份泥炭和1份沙子。
5.一種促進土黨參離體增殖的方法,其特征在于,包括如下步驟:
(1)選取健壯的土黨參植株,采摘成熟果實作為外植體;
(2)在無菌條件下,對步驟(1)所得成熟果實中尚未裂開的果實進行表面消毒后,取出種子然后接種在初代培養(yǎng)基上以誘導(dǎo)無菌苗;
(3)將步驟(2)中獲得的無菌苗剪切為帶不小于兩個節(jié)的帶芽莖段,接種于培養(yǎng)基1上,以獲得帶不定芽塊的莖段;
(4)將步驟(3)中獲得的帶不定芽塊的莖段及不定芽塊,接種于培養(yǎng)基2上進行繁殖得苗;
(5)將步驟(4)中獲得的苗,接種于培養(yǎng)基3上進行壯苗;
(6)將步驟(5)中獲得的苗,經(jīng)100~300mg/L的吲哚丁酸溶液浸泡后,接種于培養(yǎng)基4上以生根;
(7)將步驟(6)中獲得的植株根部的培養(yǎng)基清洗干凈,移栽于基質(zhì)上,即可獲得完整的土黨參植株,
其中,所述培養(yǎng)基1由MS培養(yǎng)液、0.4~0.6mg/L的6-芐基氨基嘌呤,0.01~0.1mg/L的噻苯隆、25~35g/L的蔗糖以及6.5~7.5g/L的瓊脂組成;
所述培養(yǎng)基2由MS培養(yǎng)液、0.4~0.6mg/L的6-芐基氨基嘌呤、0.01~0.02mg/L的噻苯隆、25~35g/L的蔗糖以及6.5~7.5g/L的瓊脂組成;
所述培養(yǎng)基3由MS培養(yǎng)液、0.5~1.0mg/L的6-芐基氨基嘌呤、0.05~0.1mg/L的萘乙酸、25~35g/L的蔗糖以及6.5~7.5g/L的瓊脂組成;
所述培養(yǎng)基4由MS培養(yǎng)液、25~35g/L的蔗糖以及6.5~7.5g/L的瓊脂組成;
所述初代培養(yǎng)基由MS培養(yǎng)液、25~35g/L的蔗糖以及6.5~7.5g/L的瓊脂組成;
所述基質(zhì)包含以下重量比的組分:3份黃泥、2份泥炭和1份沙子。
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