[發明專利]一種中藥飲片枳殼中黃酮苷類化合物的分離檢測方法

有效

• 申請號: 201611217873.3
• 申請日: 2016-12-26
• 公開（公告）號: CN106770768B
• 公開（公告）日: 2019-12-17
• 發明（設計）人: 秦秋明;寧飛飛;侯小剛;賈夢虹;姜俊婕
• 申請（專利權）人: 上海微譜化工技術服務有限公司
• 主分類號: G01N30/02
• 分類號: G01N30/02;G01N30/06
• 代理公司: 暫無信息
• 代理人: 暫無信息

1.一種中藥飲片枳殼中黃酮苷類化合物的分離檢測方法，其特征在于，包括如下步驟：

(1)稱取中藥飲片枳殼，粉碎，采用加熱回流的方式提取，得到粗提取物；

(2)將步驟(1)中粗提取物中，加入甲醇后超聲處理，過濾，得到濾液；

(3)采用高效液相色譜法對步驟(2)中制備得到的濾液進行分離；

其中，所述高效液相色譜法的固定相填料為硅膠類填料；

所述高效液相色譜法的固定相填料為殼聚糖改性硅膠填料，或者，所述高效液相色譜法所用色譜柱的固定相填料為殼聚糖衍生物改性硅膠；

所述殼聚糖改性硅膠填料的制備方法為：將3mo1/L鹽酸中浸泡8g硅膠，并加熱回流10h，然后用二次蒸餾水洗至中性，用丙酮洗三次，在150℃下烘烤除水活化8h，冷卻后保存于干燥器中備用；取6.0g經活化的干燥硅膠，加入100mL無水干燥甲苯，攪拌下加入4.0mLKH-560和3滴三乙胺催化劑；在N₂保護下加熱回流26h，冷卻，用甲苯抽提20h，依次用丙酮、甲醇和丙酮洗滌，80℃下真空干燥8h，得到偶聯劑鍵合硅膠物質，制備得到硅膠前體；稱取硅膠前體10g，加熱攪拌下，向其中加入殼聚糖，乙酸、甲苯；滴加2滴高氯酸用作催化劑，在N₂保護下加熱回流24h，冷卻，調節PH至中性，析出固體，即得殼聚糖改性硅膠；

所述殼聚糖衍生物改性硅膠填料的制備方法為：將3mo1/L鹽酸浸泡硅膠，并回流10h，然后用二次蒸餾水洗至中性，用丙酮洗三次，在160℃下烘烤除水活化8h，冷卻后保存于干燥器中備用；取6.0g經活化的干燥硅膠，加入100mL無水干燥甲苯，攪拌下加入4.0mL KH-560和3滴三乙胺催化劑；在N₂保護下加熱回流24h，冷卻，用甲苯抽提24h，依次用丙酮、甲醇和丙酮洗滌，80℃下真空干燥8h，得到偶聯劑鍵合硅膠物質，制備得到硅膠前體；稱取硅膠前體5g，加熱攪拌下，向其中加入1.5g殼聚糖衍生物，乙酸、甲苯；滴加2滴高氯酸用作催化劑，在N₂保護下加熱回流24h，冷卻，調節PH至中性，析出固體，即得殼聚糖衍生物改性硅膠；

所述黃酮苷類化合物為異柚皮苷、柚皮苷、橙皮苷和新橙皮苷；

所述高效液相色譜法的流動相包括水相和有機相；

所述有機相選自甲醇或乙腈中的任意一種；

所述水相選自甲酸溶液或純水中的任意一種；

所述有機相與水相的體積比為30：70～20：80；

所述中藥飲片枳殼中黃酮苷類化合物的分離檢測方法中檢測波長為245～285nm。

2.根據權利要求1所述的中藥飲片枳殼中黃酮苷類化合物的分離檢測方法，其特征在于，所述甲酸溶液的摩爾濃度為0.1％～0.5％。

3.根據權利要求2所述的中藥飲片枳殼中黃酮苷類化合物的分離檢測方法，其特征在于，所述甲酸溶液的摩爾濃度為0.2％～0.4％。