[發明專利]一種純化制備高品質生物多糖的方法

有效

• 申請號: 201611215234.3
• 申請日: 2016-12-26
• 公開（公告）號: CN108239177B
• 公開（公告）日: 2021-06-29
• 發明（設計）人: 郭宏亮;林檬;莊秀園;王軒;葉榛
• 申請（專利權）人: 浙江立恩生物科技有限公司
• 主分類號: C08B37/02
• 分類號: C08B37/02;C12P19/04;C12R1/645
• 代理公司: 上海一平知識產權代理有限公司 31266
• 代理人: 徐迅;肖艷

本發明公開了一種純化制備高品質生物多糖的方法。本發明提供的β?葡聚糖的制備方法包括下述步驟：(1)將裂褶菌發酵液與水混合進行浸煮，得浸煮液；(2)對步驟(1)所述浸煮液進行固液分離，取清液；(3)在步驟(2)得到的清液中加入活性炭，進行吸附處理，得含炭混合物；對所述含炭混合物進行固液分離，取清液；(4)將步驟(3)得到的清液與乙醇混合進行醇析，收集析出的固體；(5)將步驟(4)中所述固體進行干燥，即可得到所述β?葡聚糖。本發明方法未使用酶解工藝，成本較低。未使用酸解或堿解工藝，不會對β?葡聚糖的功能性結構造成破壞。制得的β?葡聚糖溶液粘度大，透光率高，適于各種應用。

技術領域

本發明涉及β-葡聚糖的制備方法，具體涉及一種純化制備高品質生物多糖的方法。

背景技術

多糖是指一類由10個以上單糖分子聚合而成的天然高分子化合物，廣泛分布于動物、植物、微生物(細菌和真菌)和藻類地衣中。多糖作為重要的生物活性物質具有調節免疫、抗腫瘤、降低糖脂、延緩衰老等功效，在醫療保健、食品、動物養殖等領域有著廣闊的應用前景。

β-葡聚糖是一種天然多糖。在自然環境中可以找到相當多種類的β-葡聚糖，通常存在于特殊種類的細菌、酵母菌、真菌(靈芝)的細胞壁中，也可存在于高等植物種子的包被中。其中以β-1,3-糖苷鍵為骨架的蘑菇葡聚糖具有增強免疫力、抗腫瘤、抗菌、抗病毒等功能，在保濕、抗皺、抗氧化、抗紫外、促進傷口愈合等方面也具有顯著效果，此外，與傳統的酵母或谷物葡聚糖相比，蘑菇葡聚糖具有更均一穩定的結構、更高的分子質量及更為優良的水溶性。因此高粘度、高透光率的蘑菇β-葡聚糖溶液廣泛應用于食品、化妝品及制藥領域，制備高粘度、高透光率的蘑菇β-葡聚糖溶液具有重要的意義。

目前，β-葡聚糖的提取方法主要有兩種，其一是從燕麥等谷物或蘑菇等子實體真菌中直接提取；其二是通過真菌或細菌的液體發酵，經由對發酵液進行提取加工，以獲得β-葡聚糖。發酵法制備β-葡聚糖，純化時需要除去發酵過程中產生的核酸及蛋白質等雜質，傳統方法使用酸堿處理或酶處理來去除核酸和蛋白質，成本高昂且酸堿處理會對葡聚糖造成破壞。

發明內容

本發明的目的是提供一種純化制備高品質β-葡聚糖的方法，本發明方法操作簡便，無需經酸堿及酶解處理，所制備得到的β-葡聚糖溶液具有高粘度、高透光率。

本發明提供的一種β-葡聚糖的制備方法，包括下述步驟：

(1)將裂褶菌發酵液和水混合進行浸煮，得浸煮液；

(2)對步驟(1)所述浸煮液進行固液分離，取清液；

(3)在步驟(2)得到的清液中加入活性炭，進行吸附處理，得含炭混合物；對所述含炭混合物進行固液分離，取清液；

(4)將步驟(3)得到的清液與乙醇混合進行醇析，收集析出的固體；

(5)將步驟(4)中所述固體進行干燥，即可得到所述β-葡聚糖。

上述的制備方法中，步驟(1)中，所述裂褶菌發酵液可采用常規液體發酵方法制備，可為普通發酵條件制備或者發酵條件優化后制備得到的裂褶菌(Schizophyllumcommune Fr.)發酵液。具體可通過如下步驟制備得到：

(a)裂褶菌菌種活化：將馬鈴薯200g/L、葡萄糖20～30g/L、氯化鈉10～20g/L、瓊脂15～20g/L制成平板培養基，把裂褶菌菌種接種到該平板培養基上，于20℃～30℃恒溫培養箱內培養4～10天得到平板菌絲體；

(b)種子活化：將馬鈴薯淀粉50～200g/L、葡萄糖20～60g/L、酵母浸膏1～10g/L、酵母浸粉1～10g/L、水制成的液體培養基裝入搖瓶，裝液量為1/5～1/3，取步驟(a)所得的平板菌絲體接種該搖瓶，于20℃～30℃恒溫搖床內100～220rpm震蕩培養4～10天，作為種子液；