[發明專利]一種副流感病毒一步法熒光分型RT-PCR檢測試劑盒在審
| 申請號： | 201611206542.X | 申請日： | 2016-12-23 |
| 公開（公告）號： | CN108239676A | 公開（公告）日： | 2018-07-03 |
| 發明（設計）人： | 遲大利;吳大治;夏懿 | 申請（專利權）人： | 上海星耀醫學科技發展有限公司;上海復星醫藥（集團）股份有限公司 |
| 主分類號： | C12Q1/70 | 分類號： | C12Q1/70;C12Q1/686;C12N15/11 |
| 代理公司： | 暫無信息 | 代理人： | 暫無信息 |
| 地址： | 201315 上海*** | 國省代碼： | 上海;31 |
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| 摘要： | |||
| 搜索關鍵詞： | 副流感病毒 熒光 一步法 分型檢測 試劑盒 分型 樣本 一步法擴增 分型引物 檢測結果 內參基因 特異性強 陽性對照 陰性對照 混合物 可信度 敏感度 強陽性 咽拭子 可用 人鼻 探針 內參 污染 預防 | ||
1.一種副流感病毒一步法熒光分型RT-PCR檢測試劑盒，其特征在于：本發明通過考察已知副流感病毒（Human Parainfluenza viruses, HPIV）基因組全序列，并根據檢索所得HPIV不同基因型一致性保守序列設計出一對1型副流感病毒核酸序列特異性引物、一對2型副流感病毒核酸序列特異性引物、一對3型副流感病毒核酸序列特異性引物、一對外源性內參系列特異性引物、一條1型副流感病毒特異性探針、一條2型副流感病毒特異性探針、一條3型副流感病毒特異性探針和一條外源性內參特異性探針，采用實時熒光RT-PCR方法擴增目的基因。
2.權利要求1所述的副流感病毒一步法熒光分型RT-PCR檢測試劑盒，其特征在于：1型、2型和3型副流感病毒RNA特異性PCR擴增的基因序列和內參基因序列分別為：
〈SEQ ID No.1〉
5’-CCTGAAGCCGAAGGAGAGGCACCACGAAAACAAGAATCACTCTCAGGTGTCATCGGACTCCTTGACGTCGTCCTATCCTACAAGCCCACCGAAATTGGAG-3’，
〈SEQ ID No.2〉
5’-TTCCTAAAAGGACATGTAGAATCATTTTCCGAACTGCCACAATTCTTGGCATATGCACATTAATTGTGCTATGTTCAAGTATTCTTCATG-3’，
〈SEQ ID No.3〉
5’-GCTGGTAATGAGCTGGAAACATCCATGGCTACTCATGGCAACAAGATCACCAACAAGATAACATATATATTATGGACAATAATCCTGGTGTTATTATC-3’，
〈SEQ ID No.4〉
5’-CATTGCTTCCATTGATGGCTTAAAGGACACCACCAATTGGTTCCTCTCTGTGCACAGGCTAATTTTTTAGGGAAAATCTGGCCTTCCCACAAGGGGAGGCCAGGGAATTTTCTTCACGTGCGCTGCYGAAGATCAAA-3’，
副流感病毒一步法熒光分型RT-PCR檢測試劑盒中1型、2型和3型副流感病毒擴增基因序列全長分別為100 bp、90bp和98 bp，均屬血細胞凝集素神經氨酸酶基因，且均為單拷貝序列；內參基因序列全長137 bp，均與三種副流感病毒擴增基因中的探針序列有所不同。
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