[發(fā)明專利]一種北美海棠的組織培養(yǎng)方法

在審

• 申請?zhí)枺?/td>: 201611205319.3
• 申請日: 2016-12-23
• 公開（公告）號: CN106613980A
• 公開（公告）日: 2017-05-10
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 江文林;沈成山;陳旭銳;江濤
• 申請（專利權(quán)）人: 滁州綠泉生態(tài)農(nóng)業(yè)有限公司
• 主分類號: A01H4/00
• 分類號: A01H4/00
• 代理公司: 暫無信息
• 代理人: 暫無信息

1.一種北美海棠的組織培養(yǎng)方法，其特征在于：該北美海棠的組織培養(yǎng)方法具體步驟如下：

S1：培養(yǎng)基的制作，采用MS培養(yǎng)基作為培養(yǎng)基體，培養(yǎng)基的制作需要在無菌環(huán)境下進(jìn)行，且MS培養(yǎng)基的PH值控制在5.6-6.0；

S2：繁殖枝條的處理：

對北美海棠植株的選擇，選擇北美海棠植株時(shí)需要注意避免選擇有病變的植株體，

選擇表面較為潔凈的枝條作為備選材料，備選枝條不僅需要潔凈要求，同時(shí)需要注意枝條上需要有至少3個(gè)腋芽，

對枝條的剪切，將確定選擇的枝條剪切下來，剪切時(shí)注意避免對枝條上腋芽和表皮破壞，

枝條的清潔，將枝條放入到流動水下進(jìn)行反復(fù)的沖洗，流動水下沖洗后，采用硫磺消毒肥皂水用軟毛刷蘸取對枝條表皮進(jìn)行洗刷，注意保護(hù)表皮完好，尤其需要注意對腋芽進(jìn)行保護(hù)，

流動水的再次沖洗，采用流動水將枝條上的肥皂沫沖洗干凈；

S3：繁殖塊的處理：

將沖洗潔凈的枝條在潔凈無菌工作臺上切成1-1.5厘米的小段，同時(shí)小段上必須帶有腋芽，且腋芽處于距離頂端三分之一處，

將切好的繁殖塊在75％酒精中進(jìn)行消毒處理，消毒時(shí)間為6-8秒，然后將消毒后的繁殖塊在無菌水下沖洗，將酒精沖洗去，在濃度為0.08％氯化汞溶液中進(jìn)行二次消毒處理，消毒時(shí)間為15-25秒，消毒結(jié)束后再在無菌水下反復(fù)沖洗，將殘留的氯化汞溶液沖洗干凈，利用潔凈無菌吸水紙將繁殖塊表面水份去除，

S4：從芽誘導(dǎo)和繁殖階段，將消毒后的繁殖塊放入到MS培養(yǎng)基中進(jìn)行從芽誘導(dǎo)和繁殖，同時(shí)需要向MS培養(yǎng)基中加入濃度為1.0 mg/L的6-BA 和1.5 mg/L的NAA ，6-BA和NAA的重量組份比為1:1，加入培養(yǎng)基中以覆蓋培養(yǎng)基表面1㎜為準(zhǔn)，在無菌環(huán)境下進(jìn)行培育，直至可以明顯的觀測到叢生芽為止；

S5：叢生芽的分化培育階段，將繁殖塊取出，將叢生芽切下，換入到新的MS培養(yǎng)基中進(jìn)行分化培育，同時(shí)需要向MS培養(yǎng)基中加入濃度為3.0 mg/L的6-BA 和0.3 mg/L的IAA，6-BA和IAA的重量組份比為2:1，加入培養(yǎng)基中以覆蓋培養(yǎng)基表面0.5㎜為準(zhǔn)，繼續(xù)培育直到出現(xiàn)真根；

S6：溶液的培養(yǎng)，在培養(yǎng)基中培養(yǎng)出現(xiàn)真根后轉(zhuǎn)入到去除瓊脂的MS培養(yǎng)基溶液中進(jìn)行培養(yǎng)，從而真根可以更好的生長，轉(zhuǎn)入到培養(yǎng)基溶液中培養(yǎng)一周后可以進(jìn)行土壤中的栽培，完成北美海棠的組織培養(yǎng)。

2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種北美海棠的組織培養(yǎng)方法方法，其特征在于：所述對枝條剪切以后繁殖塊的剪切中，需要注意切口的平齊，切口需要保持平整，避免毛口切面的發(fā)生。

3.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種北美海棠的組織培養(yǎng)方法方法，其特征在于：所述在酒精和氯化汞中消毒需要注意消毒時(shí)間，避免消毒時(shí)間過久導(dǎo)致組織的損壞。