[發(fā)明專利]一種北美海棠的組織培養(yǎng)方法

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• 申請?zhí)枺?/td>: 201611205319.3
• 申請日: 2016-12-23
• 公開（公告）號: CN106613980A
• 公開（公告）日: 2017-05-10
• 發(fā)明（設(shè)計）人: 江文林;沈成山;陳旭銳;江濤
• 申請（專利權(quán)）人: 滁州綠泉生態(tài)農(nóng)業(yè)有限公司
• 主分類號: A01H4/00
• 分類號: A01H4/00
• 代理公司: 暫無信息
• 代理人: 暫無信息

技術(shù)領(lǐng)域

本發(fā)明涉及海棠的組織培養(yǎng)技術(shù)領(lǐng)域，具體為一種北美海棠的組織培養(yǎng)方法。

背景技術(shù)

北美海棠通過從美國引種，又稱美國海棠，中國已擁有了一批新的海棠品種，并在北方城市綠化中得以應(yīng)用。這批美國海棠品種都具有很好的觀賞效果，既可觀花又可觀果，耐寒性強，適合在中國北方種植。主要品種有“道格”海棠、“火焰”海棠、“寶石”海棠、“凱爾斯”海棠、“粉芽”海棠、“絢麗”海棠、“紅玉”海棠、“紅麗”海棠、“王族”海棠、“雪球”海棠、“鉆石”海棠、“草莓果凍”海棠等。其中“紅玉”海棠為垂枝的品種，“凱爾斯”為重瓣花的新品種，“王族”海棠葉色紫紅，是觀花觀葉的優(yōu)秀品種。這些海棠的花期為4月下旬，花色極為豐富，主要體現(xiàn)在白色、粉色、紫色、紅色等色系中，有不同色深及冷暖色調(diào)差異。美國海棠抗性強、耐寒、耐極薄，管理容易，觀賞效果好，在園林綠化中適于列植于道路兩旁，亦可孤植、叢植于草坪上或點綴于巖石旁、湖水邊。可以通過組織培育的方式實現(xiàn)對北美海棠的快速培育，實現(xiàn)種苗的大批量獲取。

發(fā)明內(nèi)容

本發(fā)明的目的在于提供一種北美海棠的組織培養(yǎng)方法，該北美海棠的組織培養(yǎng)方法具體步驟如下：

S1：培養(yǎng)基的制作，采用MS培養(yǎng)基作為培養(yǎng)基體，培養(yǎng)基的制作需要在無菌環(huán)境下進行，且MS培養(yǎng)基的PH值控制在5.6-6.0；

S2：繁殖枝條的處理：

1）對北美海棠植株的選擇，選擇北美海棠植株時需要注意避免選擇有病變的植株體，

2）選擇表面較為潔凈的枝條作為備選材料，備選枝條不僅需要潔凈要求，同時需要注意枝條上需要有至少3個腋芽，

3）對枝條的剪切，將確定選擇的枝條剪切下來，剪切時注意避免對枝條上腋芽和表皮破壞，

4）枝條的清潔，將枝條放入到流動水下進行反復(fù)的沖洗，流動水下沖洗后，采用硫磺消毒肥皂水用軟毛刷蘸取對枝條表皮進行洗刷，注意保護表皮完好，尤其需要注意對腋芽進行保護，

5）流動水的再次沖洗，采用流動水將枝條上的肥皂沫沖洗干凈；

S3：繁殖塊的處理：

1）將沖洗潔凈的枝條在潔凈無菌工作臺上切成1-1.5厘米的小段，同時小段上必須帶有腋芽，且腋芽處于距離頂端三分之一處，

2）將切好的繁殖塊在75％酒精中進行消毒處理，消毒時間為6-8秒，然后將消毒后的繁殖塊在無菌水下沖洗，將酒精沖洗去，在濃度為0.08％氯化汞溶液中進行二次消毒處理，消毒時間為15-25秒，消毒結(jié)束后再在無菌水下反復(fù)沖洗，將殘留的氯化汞溶液沖洗干凈，利用潔凈無菌吸水紙將繁殖塊表面水份去除，

S4：從芽誘導(dǎo)和繁殖階段，將消毒后的繁殖塊放入到MS培養(yǎng)基中進行從芽誘導(dǎo)和繁殖，同時需要向MS培養(yǎng)基中加入濃度為1.0 mg/L的6-BA 和1.5 mg/L的NAA ，6-BA和NAA的重量組份比為1:1，加入培養(yǎng)基中以覆蓋培養(yǎng)基表面1㎜為準，在無菌環(huán)境下進行培育，直至可以明顯的觀測到叢生芽為止；

S5：叢生芽的分化培育階段，將繁殖塊取出，將叢生芽切下，換入到新的MS培養(yǎng)基中進行分化培育，同時需要向MS培養(yǎng)基中加入濃度為3.0 mg/L的6-BA 和0.3 mg/L的IAA，6-BA和IAA的重量組份比為2:1，加入培養(yǎng)基中以覆蓋培養(yǎng)基表面0.5㎜為準，繼續(xù)培育直到出現(xiàn)真根；

S6：溶液的培養(yǎng)，在培養(yǎng)基中培養(yǎng)出現(xiàn)真根后轉(zhuǎn)入到去除瓊脂的MS培養(yǎng)基溶液中進行培養(yǎng)，從而真根可以更好的生長，轉(zhuǎn)入到培養(yǎng)基溶液中培養(yǎng)一周后可以進行土壤中的栽培，完成北美海棠的組織培養(yǎng)。

優(yōu)選的，所述對枝條剪切以后繁殖塊的剪切中，需要注意切口的平齊，切口需要保持平整，避免毛口切面的發(fā)生。

優(yōu)選的，所述在酒精和氯化汞中消毒需要注意消毒時間，避免消毒時間過久導(dǎo)致組織的損壞。

與現(xiàn)有技術(shù)相比，本發(fā)明的有益效果是：本發(fā)明采用繁殖塊與叢生芽的分布培育方式，通過更換培養(yǎng)基的方式來進行培養(yǎng)，大大提高繁殖塊的生根概率，提高組織培育的科學(xué)性，大大提高北美海棠的培育效果。

具體實施方式

為了使本發(fā)明的目的、技術(shù)方案及優(yōu)點更加清楚明白，以下結(jié)合具體實施例，對本發(fā)明進行進一步詳細說明。應(yīng)當(dāng)理解，此處所描述的具體實施例僅僅用以解釋本發(fā)明，并不用于限定本發(fā)明。

實施例1

一種北美海棠的組織培養(yǎng)方法，該北美海棠的組織培養(yǎng)方法具體步驟如下：

S1：培養(yǎng)基的制作，采用MS培養(yǎng)基作為培養(yǎng)基體，培養(yǎng)基的制作需要在無菌環(huán)境下進行，且MS培養(yǎng)基的PH值控制在5.6；