[發(fā)明專利]一種黃金柏初代培養(yǎng)方法

在審

• 申請?zhí)枺?/td>: 201611204720.5
• 申請日: 2016-12-23
• 公開（公告）號: CN106613979A
• 公開（公告）日: 2017-05-10
• 發(fā)明（設(shè)計）人: 周余華;周琴;蔣濤;張虎;王紅梅
• 申請（專利權(quán)）人: 江蘇農(nóng)林職業(yè)技術(shù)學(xué)院
• 主分類號: A01H4/00
• 分類號: A01H4/00
• 代理公司: 南京蘇高專利商標(biāo)事務(wù)所(普通合伙)32204
• 代理人: 許丹丹

1.一種黃金柏初代培養(yǎng)方法，其特征在于，包括以下步驟：

(1)培養(yǎng)基配制：選擇基礎(chǔ)培養(yǎng)基，加入蔗糖和瓊脂，再加入6-芐氨基腺嘌呤和萘乙酸，調(diào)節(jié)pH值，滅菌，即得；

(2)外植體采集：選擇帶腋芽和頂芽的黃金柏莖作為外植體，剪取枝條時每個枝條上存留至少一個側(cè)芽；

(3)外植體的消毒：取上述外植體，清洗，消毒；

(4)接種培養(yǎng)：將步驟(3)所得外植體舊傷口剪去，插入步驟(1)所得培養(yǎng)基中，置于培養(yǎng)室內(nèi)培養(yǎng)。

2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的黃金柏初代培養(yǎng)方法，其特征在于，所述步驟(1)中基礎(chǔ)培養(yǎng)基為MS培養(yǎng)基。

3.根據(jù)權(quán)利要求1所述的黃金柏初代培養(yǎng)方法，其特征在于，所述步驟(1)中蔗糖和瓊脂的濃度分別為30g/L和7g/L。

4.根據(jù)權(quán)利要求1所述的黃金柏初代培養(yǎng)方法，其特征在于，所述步驟(1)中6-芐氨基腺嘌呤的濃度為0.8-1.2mg/L，所述萘乙酸的濃度為0.1-0.3mg/L。

5.根據(jù)權(quán)利要求1所述的黃金柏初代培養(yǎng)方法，其特征在于，所述步驟(1)中pH值為5.8～6.0，滅菌條件為：121℃高壓下滅菌25min。

6.根據(jù)權(quán)利要求1所述的黃金柏初代培養(yǎng)方法，其特征在于，所述步驟(3)中清洗的方法為：先用洗衣粉加水漂洗3-5遍，再用自來水沖洗，直至外植體干凈。

7.根據(jù)權(quán)利要求1所述的黃金柏初代培養(yǎng)方法，其特征在于，所述步驟(3)中消毒的方法為：在無菌環(huán)境下，依次用75％的酒精漂洗30s，無菌水漂洗1次，再用1％次氯酸鈉進(jìn)行浸泡15min，然后再用滅菌水沖洗3次，最后用升汞進(jìn)行5min的漂洗，無菌水漂洗3次后，殘留的水分用無菌濾紙吸取。

8.根據(jù)權(quán)利要求1所述的黃金柏初代培養(yǎng)方法，其特征在于，所述步驟(4)中培養(yǎng)的條件為：1600Lx的光照強(qiáng)度，每天進(jìn)行16h光照，溫度穩(wěn)定在(25±2)℃，以及75％的濕度。