[發(fā)明專利]一種低成本純化九勝肽-1的方法有效
| 申請?zhí)枺?/td> | 201611197530.5 | 申請日: | 2016-12-22 |
| 公開(公告)號: | CN106749526B | 公開(公告)日: | 2020-06-19 |
| 發(fā)明(設計)人: | 蘇晨燦;郭添;王慧;韓廣;張忠旗;王萬科;王惠嘉;趙金禮;楊小琳 | 申請(專利權)人: | 陜西慧康生物科技有限責任公司 |
| 主分類號: | C07K7/06 | 分類號: | C07K7/06;C07K1/36;C07K1/34;C07K1/20;C07K1/18 |
| 代理公司: | 西安永生專利代理有限責任公司 61201 | 代理人: | 高雪霞 |
| 地址: | 710054 陜西省西安市雁*** | 國省代碼: | 陜西;61 |
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| 摘要: | |||
| 搜索關鍵詞: | 一種 低成本 純化 九勝肽 方法 | ||
1.一種低成本純化九勝肽-1的方法,其特征在于它由下述步驟組成:
(1)溶樣
將九勝肽-1粗品溶解于蒸餾水中,用濾膜過濾,收集濾液;其中九勝肽-1粗品與蒸餾水的質(zhì)量體積比為1g:15~50mL;
(2)粗純
采用高效液相色譜法,用反相聚合物柱對濾液進行粗純,填料為粒徑30~50μm的F型SBC MCI GEI反相色譜填料,流動相A為0.1mol/L 三氟乙酸水溶液,流動相B為0.1mol/L三氟乙酸甲醇溶液,進行梯度洗脫純化,流動相梯度選擇0到10分鐘 A:B由70:30到59:41,15到40分鐘A:B由45:55到40:60,流動相的流速為4~10mL/分鐘,上樣和洗脫的柱溫為35~45℃;收集粗純后的九勝肽-1溶液,減壓濃縮;
(3)轉鹽
將步驟(2)得到的濃縮液用弱陰離子交換柱去除三氟乙酸,轉換成醋酸型九勝肽-1,填料為粒徑50~160μm的DEAE高流速瓊脂糖微球,流動相為體積濃度2%的醋酸水溶液,流動相的流速為4~10mL/分鐘,上樣和洗脫的柱溫為35~45℃;收集醋酸型九勝肽-1溶液,減壓濃縮,得到純度大于99%的醋酸型九勝肽-1。
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