[發明專利]一種胸腺法新的合成方法

有效

• 申請號: 201611192924.1
• 申請日: 2016-12-21
• 公開（公告）號: CN108218980B
• 公開（公告）日: 2020-12-08
• 發明（設計）人: 張貴民;王孝花;李彥磊;趙亮亮
• 申請（專利權）人: 魯南制藥集團股份有限公司
• 主分類號: C07K14/575
• 分類號: C07K14/575;C07K1/06;C07K1/04
• 代理公司: 暫無信息
• 代理人: 暫無信息

本發明涉及一種胸腺法新的合成方法，采用先三段(片段1～8、片段9～18和片段19～28)分別合成，再片段間進行縮合的方法。本發明的合成方法可以有效的提高粗品的純度，降低雜質含量，使之易于純化，從而降低成本，更加適合于工業化生產。

技術領域

本發明屬醫藥技術領域，涉及一種胸腺法新的合成方法。

背景技術

胸腺法新，曾用名胸腺素α1、胸腺肽α1，是一種新型免疫調節因子，1997年由意大利賽生(Sciclone)公司開發上市，商品名稱“日達仙”(Zadaxin)，臨床上應用胸腺法新提高T細胞的免疫功能，治療病毒性肝炎和延緩某些老年病的發生與發展。另外，胸腺法新還有抗感染、抗病毒和抗腫瘤的功效，尤其對癌癥的免疫性治療也具有一定的作用。

目前胸腺法新的合成方式主要有兩種，一種為Boc策略，一種為Fmoc策略，Boc策略由于用到劇毒的HF，現在已經較少使用。關于Fmoc策略有較多的報道，如《天津藥學》2001年第13卷第3期《Fmoc新型固相法合成胸腺素α1及其反應途徑》描述了以HMP樹脂為載體，以DCC-HOBT為耦合劑合成胸腺法新的方法；《化工學報》2004年第55卷第2期《胸腺素α1的DIC固相化學合成與鑒定》描述了以王樹脂為載體，以DIC-HOBT為耦合劑合成胸腺法新的方法；專利CN101104638A描述了以Fmoc-RinkAmideMBHA樹脂和Fmoc-Asp-X合成胸腺法新的方法；專利CN102199205A描述了以羥基官能團樹脂為載體，以DIC-HOBT為耦合劑合成胸腺法新的方法。

目前合成工藝中存在以下問題：首先，在多肽序列的某些氨基酸殘基處，經多次的縮合反應會引起側鏈反應；其次，隨著肽段的延伸，其溶解性降低，可能形成分子內的折疊結構，即存在所謂“困難序列”，使氨基酸縮合反應很難進行徹底，而且脫除氨基保護基團Fmoc也很困難。這些問題都將導致副產物不斷累積，使得在最終的粗品中存在大量的缺失肽及空心肽，目標產物肽收率低，并且這些雜質與目標肽在結構上很相似，難以純化。

本發明采用分段合成的策略，可以有效改善或解決上述問題，縮短了合成周期、提高了粗品的純度，更有利于工業化生產。

發明內容

本發明的目的在于提供一種胸腺法新的合成方法，采用先三段(片段1～8、片段9～18和片段19～28)分別合成，再片段間進行縮合的方法。

為了實現本發明的目的，發明人通過大量試驗研究，最終獲得了如下技術方案：

一種胸腺法新的合成方法，采用先三段(片段1～8、片段9～18和片段19～28)分別合成，再片段間進行縮合的方法，其特征在于該方法包括以下步驟：

(1)將Fmoc-Asn(Trt)-OH和替代值為0.3mmol/g～0.8mmol/g的2-氯三苯甲基(CTC)樹脂在DMF溶液中混合，加入DIEA溶液，經酯化反應得到Fmoc-Asn(Trt)-CTC樹脂；

(2)將Fmoc-Asn(Trt)-CTC樹脂和體積比10％-50％的哌啶DMF溶液組成的脫保護液混合，得到H₂N-Asn(Trt)-CTC樹脂，將Fmoc-Glu(OtBu)-OH和H₂N-Asn(Trt)-CTC樹脂耦合，得到Fmoc-Glu(OtBu)-Asn(Trt)-CTC樹脂，重復以上步驟，得到Fmoc-Glu(OtBu)-Val-Val-Glu(OtBu)-Glu(OtBu)-Ala-Glu(OtBu)-Asn(Trt)-CTC(片段1-8)樹脂；將Fmoc-Glu(OtBu)-Val-Val-Glu(OtBu)-Glu(OtBu)-Ala-Glu(OtBu)-Asn(Trt)-CTC(片段1-8)樹脂加入10％-50％哌啶/DMF溶液分別脫Fmoc保護基10min和20min，抽干脫保護液，用DMF洗滌樹脂。