[發(fā)明專利]原料藥蜂蠟GC標(biāo)準(zhǔn)指紋圖譜及其構(gòu)建方法

有效

• 申請?zhí)枺?/td>: 201611189433.1
• 申請日: 2016-12-21
• 公開（公告）號: CN106645475B
• 公開（公告）日: 2020-04-17
• 發(fā)明（設(shè)計）人: 羅春;黃翔;張利芳
• 申請（專利權(quán)）人: 廣州白云山醫(yī)藥集團股份有限公司白云山化學(xué)制藥廠
• 主分類號: G01N30/02
• 分類號: G01N30/02
• 代理公司: 廣州三辰專利事務(wù)所(普通合伙) 44227
• 代理人: 范欽正

本發(fā)明公開了原料藥蜂蠟GC標(biāo)準(zhǔn)指紋圖譜及其構(gòu)建方法，屬于化學(xué)分析和蜂蠟質(zhì)量檢測技術(shù)領(lǐng)域。該構(gòu)建方法包括供試品溶液的制備，采用HP?5色譜柱，氮氣為載氣，流速為5mL/min，檢測器為氫火焰檢測器，檢測器溫度為310℃，進樣口溫度為330℃，分流比為20：1，氫氣流速為40mL/min，空氣流速為30mL/min，進樣量為1μL，柱箱升溫方式為280℃維持15min，以氣相色譜法進行測定蜂蠟的指紋圖譜，以至少10批指紋圖譜的共有特征峰作為標(biāo)準(zhǔn)指紋圖譜的特征峰，標(biāo)準(zhǔn)指紋圖譜共有11個特征峰，圖譜經(jīng)過計算機輔助相似度評價軟件進行相似度評價。本發(fā)明方法及標(biāo)準(zhǔn)指紋圖譜能全面、準(zhǔn)確評價蜂蠟原料藥的質(zhì)量，有利于保證蜂蠟原料的質(zhì)量及臨床療效。

技術(shù)領(lǐng)域

本發(fā)明涉及一種蜂蠟藥物的檢測方法，特別涉及一種蜂蠟GC標(biāo)準(zhǔn)指紋圖譜的構(gòu)建方法，以及由此法得到的蜂蠟GC標(biāo)準(zhǔn)指紋圖譜。

背景技術(shù)

中藥指紋圖譜是指中藥原料藥材、飲片、成品、半成品等經(jīng)適當(dāng)處理后，采用一定的分析手段，得到的能夠標(biāo)示其特征共有峰的圖譜。中藥指紋圖譜能客觀地揭示和反映中藥內(nèi)在質(zhì)量的整體性和特征性,用以評價中藥的真實性、有效性、穩(wěn)定性和一致性。中藥的臨床療效并非由單一活性成分的作用或多種活性成分作用的簡單相加,用已知某一個或幾個活性成分或有效成分為質(zhì)量指標(biāo),通過定性和定量分析來判斷藥品質(zhì)量的優(yōu)劣,顯然是不全面的。中藥質(zhì)量的評價需要綜合的、宏觀的、非線性的質(zhì)量評價體系,中藥指紋圖譜就是能較好地適應(yīng)這一特點的一種質(zhì)量評價與控制模式。天然藥和草藥,都把指紋圖譜作為質(zhì)量控制標(biāo)準(zhǔn)的內(nèi)容之一。歐共體對草藥質(zhì)量的指南中也稱,單靠測定某有效成分考察質(zhì)量的穩(wěn)定性是不夠的,因為草藥及其制劑是以整體為活性物質(zhì)。世界衛(wèi)生組織(WHO)在1996年草藥評價指導(dǎo)原則中規(guī)定:如果草藥的活性成分不明,可以提供特征色譜圖譜,以證明產(chǎn)品質(zhì)量的一致。因此指紋圖譜是中藥現(xiàn)代化和國際化的關(guān)鍵技術(shù)之一。

蜂蠟為蜜蜂科昆蟲中華蜂蜜或意大利蜂分泌的蠟質(zhì)。其主要成分有酯類、游離的烷醇類、烷酸類、維生素、芳香類物質(zhì)等。蜂蠟具有多種藥理作用，比如降血脂、抑菌、治療胃潰瘍等藥理作用，因此蜂蠟在醫(yī)藥行業(yè)具有廣泛的應(yīng)用。

2010版《中國藥典》僅有性狀鑒別的描述，理化鑒別、檢查項、含量測定等項均為空白，上述標(biāo)準(zhǔn)不能有效的監(jiān)控蜂蠟的質(zhì)量優(yōu)劣。

發(fā)明內(nèi)容

為了解決上述問題，本發(fā)明建立了一種合理、準(zhǔn)確評價蜂蠟整體性質(zhì)量的標(biāo)準(zhǔn)指紋圖譜，以及該指紋圖譜的構(gòu)建方法。

本發(fā)明的目的在于提供一種原料藥蜂蠟GC標(biāo)準(zhǔn)指紋圖譜的構(gòu)建方法。

本發(fā)明的另一目的在于提供原料藥蜂蠟GC標(biāo)準(zhǔn)指紋圖譜。

本發(fā)明所采用的技術(shù)方案是：

一種原料藥蜂蠟GC標(biāo)準(zhǔn)指紋圖譜的構(gòu)建方法，包括以下步驟：

1)從全國各不同地區(qū)收集不同批次的蜂蠟10批，進行編號。

2)對蜂蠟進行預(yù)處理，清理其中的雜質(zhì)。方法是水浴加熱至80℃然后冷凝，取上層固體蜂蠟使用。

3)制備蜂蠟供試品溶液：精密稱取蜂蠟50mg置于50ml容量瓶中，加入三氯甲烷，超聲使其完全溶解，定容，使得蜂蠟溶液的濃度為1mg/ml左右。

4)空白溶液的制備：取少量三氯甲烷溶液置于氣相色譜進樣瓶中，作為空白溶液和色譜峰相對保留時間的對照。

5)蜂蠟的GC指紋圖譜的建立：分別取供試品溶液和空白溶液，進樣，用安捷倫氣相色譜儀進行測定，色譜柱HP-5用(5％-苯基)-甲基聚硅氧烷為填充劑，氮氣為載氣流速為5mL/min，檢測器為氫火焰檢測器，檢測器溫度為310℃，進樣口溫度為330℃，分流比為20：1，氫氣流速為40mL/min，空氣流速為30mL/min，進樣量為1μL，柱箱升溫方式為280℃維持15min。記錄供試品的保留時間和峰面積，即得蜂蠟的GC指紋圖譜。