[發明專利]熒光免疫層析測試基線數據的處理方法有效
| 申請號: | 201611187363.6 | 申請日: | 2016-12-20 |
| 公開(公告)號: | CN107367610B | 公開(公告)日: | 2019-04-16 |
| 發明(設計)人: | 王佩瑞;李歡;倪曉濤;陸亮;肖琨;周亦迪;郭昊巖;曹秋岑 | 申請(專利權)人: | 上海艾瑞德生物科技有限公司 |
| 主分類號: | G01N33/558 | 分類號: | G01N33/558;G01N33/543;G01N33/533 |
| 代理公司: | 上海一平知識產權代理有限公司 31266 | 代理人: | 徐嘉慧;馬思敏 |
| 地址: | 201114 上海市閔*** | 國省代碼: | 上海;31 |
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| 摘要: | |||
| 搜索關鍵詞: | 熒光 免疫 層析 測試 基線 數據 處理 方法 | ||
本發明提供了一種處理熒光免疫層析測試基線數據的方法,包括提供一免疫層析試紙條、一激發光源和一受激光讀取裝置,使所述激發光源產生激發光,照射在所述層析試紙條的近端上,從而形成光斑,并通過所述受激光讀取裝置讀取光斑區域發出的受激光;通過所述控制裝置控制光斑在試紙條上沿層析試紙條的近端至遠端方向,從當前位置移動到下一位置,并讀取下一位置處光斑區域發出的受激光;基于讀取的受激光信號強度,采用擬合基線法確定基線所在曲線。
技術領域
本發明屬于檢測領域,具體地說,本發明涉及一種熒光免疫層析測試數據優化處理方法,更具體地,本發明涉及一種熒光測試儀的基線數據處理方法。
背景技術
熒光檢測儀器輸出的譜圖中,通常會使用信號值與基線值的差值作為該組樣本的有效信號強度,這樣可以消除由于測試片批號不同、免疫反應批間差異等系統誤差造成的干擾因素。熒光微球在試紙條上利用毛細管作用移動初期,由于顆粒數量較多,往往此時基線數值偏高(如圖1(b)紅色虛線基線);隨著熒光微球經過測試線時,與測試線上抗體結合后,熒光微球數量減少,此時基線數值偏低(圖1(b)藍色虛線基線)。當信號峰值較高時,選取信號峰左右兩側不平基線之一或是兩者平均值,對有效信號強度影響不大;但當信號峰值偏低時,基線數值不同的讀取方式,對有效信號強度結果干擾極為明顯。
輸出的譜圖中,不同強度的信號峰值通常分為高值信號峰和低值信號峰,如圖2(a)和圖2(b)所示。
基于熒光微球在試紙條上遷移的方式,信號峰前的基線數值通常會比信號峰后的基線數值高,這個現象在低值信號峰上尤為明顯,常常使得低值信號峰呈現非高斯分布態。
因此,本領域迫切需要研究出一種熒光檢測中新的基線處理方式,尤其是改善低信號峰值區的信號結果,提高數值的準確度和靈敏度,從而優化檢測結果的準確度和靈敏度。
發明內容
本發明的目的是提供一種新的確定熒光檢測結果基線的方法。
本發明的第一方面,提供一種處理熒光免疫層析測試基線數據的方法,包括步驟:
(1)提供一免疫層析試紙條、一激發光源和一受激光讀取裝置,其中,
所述激發光源用于產生激發光,所述激發光被照射在所述層析試紙條上,從而形成光斑;
并且所述的激發光源配有控制裝置,用于控制所述的免疫層析試紙條和所述激發光源的相對位置,從而使得所述光斑沿所述層析試紙條的長度方向進行移動;
其中,所述的免疫層析試紙條設有測試線,所述試紙條長度為L0,寬度為W0,所述測試線長度為Lt;
(2)使所述激發光源產生激發光,照射在所述層析試紙條的近端上,從而形成光斑,并通過所述受激光讀取裝置讀取光斑區域發出的受激光;
(3)通過所述控制裝置控制光斑在試紙條上沿層析試紙條的近端至遠端方向,從當前位置移動到下一位置,并讀取下一位置處光斑區域發出的受激光;
(4)重復步驟(3)Z-1次,Z為≥10的正整數,直至所述光斑掃過測試線;
(5)基于讀取的受激光信號強度,設信號峰前n個點的信號強度值的算術平均值為設信號峰后m個點的信號強度值的算術平均值為當時,采用擬合基線法確定基線所在曲線,其中,n≥2,且m≥2。
在另一優選例中,當時,采用擬合基線法確定基線所在曲線,其中,Ipeak為信號峰頂點對應的信號值。
在另一優選例中,3≤n≤12。
在另一優選例中,3≤m≤12。
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