[發明專利]一種能輔助降解蛋白質并分泌抗菌肽的益生重組釀酒酵母

有效

• 申請號: 201611186552.1
• 申請日: 2016-12-20
• 公開（公告）號: CN106854657B
• 公開（公告）日: 2018-05-15
• 發明（設計）人: 張宏剛;李莉
• 申請（專利權）人: 廣州格拉姆生物科技有限公司
• 主分類號: C12N15/81
• 分類號: C12N15/81;C12N1/19;C12R1/865
• 代理公司: 廣州嘉權專利商標事務所有限公司 44205
• 代理人: 胡輝;舒勝英

1.一種能輔助降解蛋白質并分泌抗菌肽的釀酒酵母多基因共表達載體，其特征在于：該載體中含有蛋白酶基因、抗菌肽基因；

所述抗菌肽基因的堿基序列如SEQ ID NO：5所示；

所述蛋白酶基因選自酸性蛋白酶基因、中性蛋白酶基因、天冬氨酸蛋白酶基因、絲氨酸蛋白酶基因中的至少一種；

所述酸性蛋白酶基因的堿基序列如SEQ ID NO：1所示，所述中性蛋白酶基因的堿基序列如SEQ ID NO：2所示，所述天冬氨酸蛋白酶基因的堿基序列如SEQ ID NO：3所示，所述絲氨酸蛋白酶基因的堿基序列如SEQ ID NO：4所示。

2.根據權利要求1所述的一種能輔助降解蛋白質并分泌抗菌肽的釀酒酵母多基因共表達載體，其特征在于：所述蛋白酶基因為酸性蛋白酶基因和中性蛋白酶基因。

3.根據權利要求1所述的一種能輔助降解蛋白質并分泌抗菌肽的釀酒酵母多基因共表達載體，其特征在于：所述蛋白酶基因、抗菌肽基因上游均存在α-信號肽基因序列，α-信號肽基因的堿基序列如SEQ ID NO：6所示。

4.根據權利要求1～3任一項 所述的一種能輔助降解蛋白質并分泌抗菌肽的釀酒酵母多基因共表達載體，其特征在于：所述蛋白酶基因基因的啟動子選自pgk1-1、pgk1-2，終止子選自pgkt1-1、pgkt1-2；所述抗菌肽基因的啟動子為pgk1-3，終止子為pgkt1-3；

所述pgk1-1的堿基序列如SEQ ID NO：7所示；

所述pgkt1-1的堿基序列如SEQ ID NO：8所示；

所述pgk1-2的堿基序列如SEQ ID NO：9所示；

所述pgkt1-2的堿基序列如SEQ ID NO：10所示；

所述pgk1-3，的堿基序列如SEQ ID NO：11所示；

所述pgkt1-3的堿基序列如SEQ ID NO：12所示。

5.根據權利要求1～3任一項 所述的一種能輔助降解蛋白質并分泌抗菌肽的釀酒酵母多基因共表達載體，其特征在于：所述載體的骨架為pGAPZaA質粒。

6.根據權利要求1～3任一項 所述的一種能輔助降解蛋白質并分泌抗菌肽的釀酒酵母多基因共表達載體，其特征在于：該載體中含有釀酒酵母菌的25S rDNA基因片段，其堿基序列如SEQ ID NO：14所示。

7.一種能輔助降解蛋白質并分泌抗菌肽的益生重組釀酒酵母，其特征在于，該重組釀酒酵母基因組中插入有權利要求1～6任一所述的多基因共表達載體。