[發明專利]一種腫瘤標記物及其在血液中聯合檢測方法

在審

• 申請號: 201611180009.0
• 申請日: 2016-12-19
• 公開（公告）號: CN106596940A
• 公開（公告）日: 2017-04-26
• 發明（設計）人: 楊泳;張家衡;李杰寶;宋旗
• 申請（專利權）人: 楊泳
• 主分類號: G01N33/574
• 分類號: G01N33/574;G01N27/26
• 代理公司: 北京國坤專利代理事務所(普通合伙)11491
• 代理人: 黃耀鈞

技術領域

本發明屬于基因工程技術領域，尤其涉及一種腫瘤標記物及其在血液中聯合檢測方法。

背景技術

乳腺癌是女性最常見的惡性腫瘤之一，嚴重威脅女性健康，其發病率呈逐年上升趨勢。乳腺癌患者的生存率與癌癥分期密切相關。資料顯示,Ⅰ期患者5年和10年生存率分別為90.9％和83.7％；Ⅱ期分別為78.0％和65.8％；Ⅲ期分別為53.5％和43.0％，而乳腺癌遠處轉移患者(Ⅳ期)5年生存率(23％)明顯低于Ⅲ期乳腺癌患者(79％)和Ⅰ-Ⅱ乳腺癌患者(97％)。因此，早期診斷和發現是提高乳腺癌患者生存率和降低死亡率的關鍵。乳腺癌的早期診斷是一項包括臨床體檢、自我檢查、影像學檢查以及分子生物學檢查等多學科的聯合診斷。多種診斷方法的適當選擇和聯合應用可提高乳腺癌的早期診斷率，并對復發監測和評價預后起到重要作用。乳腺癌腫瘤標志物的檢測可反映腫瘤的生物學特性，對指導治療、輔助診斷、判斷預后均有重要意義。目前發現與乳腺癌相關的標志物有CEA、CA125、CA153、P53、TPS、乳清蛋白等。這些標志物被廣泛應用于乳腺癌的早期診斷和預后評估。但目前大多標志物敏感性高者特異性較低，而特異性高者敏感性較低。使用單一的腫瘤標志物進行評估可能靈敏度、準確性不夠高，器官特異性不夠強，聯合檢測常常可彌補單項指標檢測的不足。選擇對MFG-E8、CEA和CA153進行聯合檢測來診斷乳腺癌，同時與使用單一腫瘤標志物檢測進行比較，以探討聯合檢測MFG-E8、CEA和CA153診斷乳腺癌的價值。MFG-E8是一種乳汁脂肪小球表面的親脂性糖蛋白，乳脂由分化的乳腺上皮細胞合成，然后經膜包被分泌入乳導管腔，包被于脂滴表面的這層膜稱為乳脂肪球膜，主要由糖蛋白、蛋白、膽固醇、磷脂構成。乳脂肪球表皮生長因子8(MFG-E8)又稱lactadherin(乳黏素)或SED1，是乳脂肪球膜主要的糖蛋白之一，由乳腺上皮細胞、巨噬細胞、不成熟樹突狀細胞分泌。MFG-E8有兩個功能結構域，一個是氨基末端結構域中有兩個表皮生長因子(EGF)樣結構域，在第二個的EGF樣結構域中包含一個RGD(Arg-Gly-Asp，即精氨酸-甘氨酸-天門冬氨酸)整合素結合基序，以外延環形式暴露于EGF樣結構域表面。RGD基序可連接αvβ3、αvβ5異二聚體整合素，利于細胞粘附及整合素介導的信號轉導；另一個是羧基端的兩個與凝血因子V和VIII結構域同源的C樣結構域，能結合細胞膜的陰離子磷脂雙層。另外，第二個C結構域含有一個氨基的置換，可使MFG-E8與磷脂酰絲氨酸膜有更高度的親和力[3]。通過以上結構域，MFG-E8參與多種細胞間相互作用以及體機免疫清除過程，包括介導精-卵結合、附睪上皮細胞的維持、腸上皮細胞的維持與修復、促進乳腺分支形態發生、促進血管形成、促進樹突狀細胞外泌體功能、增強吞噬清除凋亡細胞等等。盡管乳脂肪球表皮生長因子最初發現于乳汁中，但它具體作用還不是很清楚，不過在乳腺癌細胞中發現MFG-E8的分泌量顯著提高。Kamran Atabai等研究發現，MFG-E8通過辨認暴露于凋亡上皮細胞表面的絲氨酸與凋亡的上皮細胞結合并促進吞噬細胞對凋亡細胞的清除，缺乏MFG-E8的小鼠乳腺組織凋亡的細胞數增多，乳腺退化和脂肪細胞再生受阻，并隨乳腺退化的進行，乳腺組織出現炎癥。Newburg等報道MFG-E8不僅能促進凋亡上皮細胞的清除，還可抑制輪狀病毒從而對乳腺起保護作用。MFG-E8能通過循環入血，因此我們可在乳腺癌患者血清中檢測出較高水平的MFG-E8，聯合腫瘤標志物CA153、CEA可能在乳腺癌的早期診斷中具有臨床意義。另外有研究已發現MFG-E8在腦膠質瘤組織中呈現出高表達，因此MFG-E8同樣可能在乳腺癌組織中呈現高表達。探索MFG-E8在乳腺癌、癌旁組織及良性腫瘤中的表達、探索MFG-E8在不同組織級別乳腺癌中的表達，可能發現MFG-E8在乳腺癌診斷、浸潤、轉移及評估預后中的意義，提供一個新的預測指標。

綜上所述，目前大多標志物敏感性高者特異性較低，而特異性高者敏感性、較低，使用單一的腫瘤標志物進行評估可能靈敏度、準確性不夠高，器官特異性不夠強。

發明內容

本發明的目的在于提供一種腫瘤標記物及其在血液中聯合檢測方法，，旨在解決目前大多標志物敏感性高者特異性較低，而特異性高者敏感性、較低，使用單一的腫瘤標志物進行評估可能靈敏度、準確性不夠高，器官特異性不夠強的問題。

本發明是這樣實現的，一種腫瘤標記物，該腫瘤標記物包括MFG-E8、CA153和CEA。

本發明另一目的在于提供一種腫瘤標記物在血液中聯合檢測方法，該腫瘤標記物在血液中聯合檢測方法包括：