[發(fā)明專利]檢測(cè)馬鈴薯主食粉或馬鈴薯主食中馬鈴薯粉含量的方法

有效

• 申請(qǐng)?zhí)枺?/td>: 201611169113.X
• 申請(qǐng)日: 2016-12-16
• 公開(kāi)（公告）號(hào): CN106841362B
• 公開(kāi)（公告）日: 2020-05-12
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 木泰華;馬夢(mèng)梅;張苗;孫紅男
• 申請(qǐng)（專利權(quán)）人: 中國(guó)農(nóng)業(yè)科學(xué)院農(nóng)產(chǎn)品加工研究所
• 主分類號(hào): G01N27/447
• 分類號(hào): G01N27/447
• 代理公司: 北京路浩知識(shí)產(chǎn)權(quán)代理有限公司 11002
• 代理人: 王文君

1.檢測(cè)馬鈴薯主食粉中馬鈴薯粉含量的方法，其特征在于，包括如下步驟：

(1)配制混合粉：按照小麥粉與馬鈴薯粉的重量比例分別為10:0，9:1，8:2，7:3，6:4，5:5，4:6，0:10配制混合粉，備用；

(2)制備標(biāo)準(zhǔn)溶液：將步驟(1)的7個(gè)混合粉分別與pH7.4的磷酸鹽-0.8％NaCl-0.05％KCl-1.5％SDS緩沖溶液以固液比1:8混合搖勻后，超聲波輔助提取80min，將所得提取液置于高速離心機(jī)中，10000-12000g離心10-15min，棄去沉淀，收集上清液，旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)濃縮或凍干后，用pH7.4的磷酸鹽-0.8％NaCl-0.05％KCl-1.5％SDS緩沖溶液復(fù)溶，即得；

(3)制備上樣溶液：向步驟(2)得到的溶液中加入還原型上樣緩沖溶液，沸水浴加熱處理5min，離心，取上清液，即得；

(4)電泳：采用12.5％的聚丙烯酰胺凝膠電泳進(jìn)行檢測(cè)，濃縮膠濃度5％，先用80V電壓電泳10min，轉(zhuǎn)用120V電壓電泳1h；

(5)染色及脫色：凝膠置于保鮮盒中，加入50mL考馬斯亮藍(lán)R250染色液，震蕩染色3h后，棄去染色液；加入50mL脫色液，震蕩脫色2h，脫色期間需更換脫色液3-4次；

(6)定量分析：采用Image J軟件對(duì)所得電泳圖中的馬鈴薯糖蛋白進(jìn)行定量分析，以小麥粉和馬鈴薯粉的重量比例為橫坐標(biāo)，馬鈴薯糖蛋白量為縱坐標(biāo)，繪制標(biāo)準(zhǔn)工作曲線，得回歸方程為y＝0.19x+0.59，R²＝0.97；

(7)待測(cè)樣品檢測(cè)：采用與步驟(2)-(6)相同的方法，僅將混合粉替換為待測(cè)樣品，并將得到的馬鈴薯糖蛋白量數(shù)值帶入回歸方程，得待測(cè)樣品中馬鈴薯粉的含量。