[發明專利]一種運用高效液相色譜法測定氨糖含量的方法

有效

• 申請號: 201611167428.0
• 申請日: 2016-12-16
• 公開（公告）號: CN106706782B
• 公開（公告）日: 2019-02-26
• 發明（設計）人: 徐小明;夏旭東;包亞君;張沛霞;陳建梅
• 申請（專利權）人: 江蘇艾蘭得營養品有限公司
• 主分類號: G01N30/02
• 分類號: G01N30/02;G01N30/06
• 代理公司: 靖江市靖泰專利事務所 32219
• 代理人: 陸平

本發明公開了一種運用高效液相色譜法測定氨糖含量的方法，其包括以下步驟：步驟一，對照品溶液的配制；步驟二，樣品處理；步驟三，確定液相色譜條件等。本發明可以快速準確測定氨糖含量，減少實驗室環境對方法的影響，降低實驗室檢測成本，提高檢測準確度、重現性，本發明對環境要求不高，樣品溶液也比較穩定，存在檢測精度高，重復性好的優點；同時，該發明減少了溶劑使用量，分析成本大大降低，提供了一種簡便、快捷、準確且低成本測定氨糖含量的高效液相色譜分析方法，檢測產品可以是原料、純氨糖片、氨糖MSM片、氨糖軟骨素片等產品，適用范圍廣，實用性強。

技術領域

本發明涉及一種測定氨糖含量的方法，特別是涉及一種運用高效液相色譜法測定氨糖含量的方法。

背景技術

氨糖的全稱是D-氨基葡萄糖，屬單糖成份，可從蟹蝦殼中萃取，是親水性極強的蛋白多糖的重要組成部分，是形成軟骨細胞的重要營養素之一，也是軟骨基質和關節液的基本成分，工業提取的氨糖分為D-氨基葡萄糖鹽酸鹽、D-氨基葡萄糖硫酸鹽 、高純硫酸氨糖三種，廣泛用于骨關節疾病的預防和治療。

最新醫學研究發現，人體內缺乏氨糖會直接導致各種骨關節疾病的發生，而氨糖流失的過程在人們35歲左右就已經開始了。氨糖不僅控制著人體骨關節的健康，還控制著關節軟骨滑膜的代謝平衡。氨糖是生物萃取得來，比較安全，沒有副作用及藥物依賴性，但成年人每日食用量最好控制在2000mg以下。所以任何氨糖補充劑中的氨糖含量還是需要控制測定。

目前國內外都有氨糖含量測定的方法，也包括一些法定方法，主要是HPLC法，它們普遍存在一些缺陷：比如方法對實驗室檢測環境要求太高（溫度控制很嚴格），檢測結果重現性不好等。而很多實驗室的環境控制達不到方法的要求，就會出現檢測結果偏差大，不穩定等現象，為了解決這一難題，本發明通過對樣品處理和色譜條件的改善，運用高效液相色譜儀高效準確的分析氨糖的含量。本方法降低了對實驗室的環境控制的要求，提高了樣品檢測的準確性，也減少了檢測成本。

發明內容

本發明所要解決的技術問題是提供一種運用高效液相色譜法測定氨糖含量的方法，其準確測定氨糖含量，減少實驗室環境對方法的影響，降低實驗室檢測成本，提高檢測準確度、重現性，本發明對環境要求不高，樣品溶液也比較穩定，存在檢測精度高，重復性好的優點；同時，該發明減少了溶劑使用量，分析成本大大降低，提供了一種簡便、快捷、準確且低成本測定氨糖含量的高效液相色譜分析方法，檢測產品可以是原料、純氨糖片、氨糖MSM片、氨糖軟骨素片等產品，適用范圍廣，實用性強。

本發明是通過下述技術方案來解決上述技術問題的：一種運用高效液相色譜法測定氨糖含量的方法，其包括以下步驟：

步驟一，對照品溶液的配制；

步驟二，樣品處理；

步驟三，確定液相色譜條件；

所述，步驟一包括以下步驟：

步驟十一，采用USP 標準品作為氨糖對照品，精密稱定適量的D-氨基葡萄糖鹽酸鹽對照品置一容量瓶中，加入醋酸鈉溶液，超聲溶解；

步驟十二，用醋酸鈉溶液稀釋至刻度，混勻作為標準儲備液；吸取適量標準儲備液至另一容量瓶中，加異硫氰酸苯酯，再加甲醇，超聲溶解，加甲醇/水至刻度，混勻，水浴中加熱，冷卻至室溫；

步驟十三，轉移上述溶液約適量至離心管中，加入庚烷，振搖，將甲醇層轉移至HPLC瓶中，進樣；

所述，步驟二包括以下步驟：

步驟二十一，精密稱取一定量的供試品置一容量瓶中，加入適量醋酸鈉溶液，超聲溶解；

步驟二十二，用醋酸鈉溶液稀釋至刻度，混勻；

步驟二十三，吸取適量上述溶液至另一容量瓶中，加異硫氰酸苯酯，再加甲醇，超聲溶解，加甲醇/水至刻度，混勻，水浴中加熱，冷卻至室溫；