[發明專利]一種來源于馬糞海膽生殖腺的水溶性多糖的制備方法及其應用有效
| 申請號： | 201611156630.3 | 申請日： | 2016-12-15 |
| 公開（公告）號： | CN106589155B | 公開（公告）日： | 2018-12-07 |
| 發明（設計）人： | 王春華;趙峰;劉永俊;辛文妤;侯桂革;杜敏 | 申請（專利權）人： | 濱州醫學院 |
| 主分類號： | C08B37/00 | 分類號： | C08B37/00;A61K31/715;A61P35/00 |
| 代理公司： | 煙臺雙聯專利事務所(普通合伙) 37225 | 代理人： | 呂靜 |
| 地址： | 264003 山*** | 國省代碼： | 山東;37 |
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| 摘要： | |||
| 搜索關鍵詞： | 總多糖 制備 水溶性多糖 馬糞海膽 生殖腺 提取液 木瓜蛋白酶酶解 凝膠柱色譜分離 海膽生殖腺 抗腫瘤藥物 抗腫瘤作用 無毒副作用 后處理 高溫加熱 藥物制劑 醫藥領域 影響多糖 除蛋白 復溶性 酶失活 上清液 水提取 醇沉 海膽 透析 性狀 生產成本 應用 開發 | ||
【權利要求書】：
1.一種來源于馬糞海膽生殖腺的水溶性多糖的制備方法，特征在于
按如下具體步驟進行：
a、取新鮮馬糞海膽的海膽生殖腺，粉碎后用丙酮脫脂，獲得海膽黃脫脂粉末；
b、脫脂粉末用2倍量體積的90-100℃熱水處理10-30min；而后加入8倍量體積的20-60℃水中提取2-6小時，再用10-20倍量體積的20-60℃水提取2-3次，合并提取液濃縮至總體積的二分之一；
c、向步驟b獲得的濃縮液中加入木瓜蛋白酶，酶解后，加熱滅活后再用Sevage法除蛋白10-15次，用旋轉蒸發儀減壓濃縮；
d、步驟c得到的多糖水溶液經流動蒸餾水透析，透析后的水液加入4倍量無水乙醇，離心得多糖沉淀，用無水乙醇洗滌、干燥得馬糞海膽總多糖HPP；
e、將步驟d所得馬糞海膽總多糖配制成50mg/ml的水溶液，用SephacrylS-300凝膠柱色譜分離，雙蒸水為流動相洗脫，每10ml收集一管，苯酚-硫酸法測定每管多糖含量，根據洗脫曲線合并洗脫液，冷凍干燥得到兩個馬糞海膽多糖，分別命名為HPP-1和HPP-2；
步驟a中，海膽生殖腺利用組織勻漿機充分粉碎后，加入1-2倍量體積的無水丙酮，常溫攪拌脫脂，重復脫脂7-10次；
步驟b中，按脫脂粉末：蛋白酶＝100:(4-8)的質量比向濃縮液中加入木瓜蛋白酶，酶解20-30h。
2.如權利要求1所述制備方法獲得的水溶性多糖在抗腫瘤藥物中的應用。
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