[發(fā)明專利]一種高產(chǎn)肝素前體的重組枯草芽孢桿菌及其應(yīng)用有效
| 申請?zhí)枺?/td> | 201611149201.3 | 申請日： | 2016-12-14 |
| 公開（公告）號： | CN106754598B | 公開（公告）日： | 2020-03-06 |
| 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人： | 康振;陳堅(jiān);堵國成;張琳培;王浩;周正雄 | 申請（專利權(quán)）人： | 江南大學(xué) |
| 主分類號： | C12N1/21 | 分類號： | C12N1/21;C12N15/75;C12P19/26;A61K31/727;A61P7/02;C12R1/125 |
| 代理公司： | 哈爾濱市陽光惠遠(yuǎn)知識產(chǎn)權(quán)代理有限公司 23211 | 代理人： | 彭素琴 |
| 地址： | 214122 江*** | 國省代碼： | 江蘇;32 |
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| 摘要： | |||
| 搜索關(guān)鍵詞： | 一種 高產(chǎn) 肝素 重組 枯草 芽孢 桿菌 及其 應(yīng)用 | ||
1.一種高產(chǎn)肝素前體的重組枯草芽孢桿菌，其特征在于，是在枯草芽孢桿菌B.subtilis 168基因組整合表達(dá)KfiC和KfiA基因的基礎(chǔ)上，以pP43NMK為表達(dá)載體共表達(dá)肝素前體合成途徑的關(guān)鍵酶基因，所述共表達(dá)是指共表達(dá)tuaD、glmU、gtaB、glmM、glmS。
2.權(quán)利要求1所述重組枯草芽孢桿菌的構(gòu)建方法，其特征在于，以整合共表達(dá)KfiC和KfiA基因的B.subtilis 168為宿主，以pP43NMK為表達(dá)載體共表達(dá)肝素前體合成途徑的關(guān)鍵酶基因；所述共表達(dá)是指共表達(dá)tuaD、gtaB、glmU、glmM、glmS。
3.一種發(fā)酵生產(chǎn)肝素前體的方法，其特征在于，所述方法是將權(quán)利要求1所述的重組枯草芽孢桿菌接種至發(fā)酵培養(yǎng)基中，在37℃下培養(yǎng)24～60h。
4.根據(jù)權(quán)利要求3所述的方法，其特征在于，所述發(fā)酵培養(yǎng)基以蔗糖為碳源。
5.根據(jù)權(quán)利要求3所述的方法，其特征在于，所述發(fā)酵培養(yǎng)基的組成成為分：20g/L酵母粉，50g/L蔗糖，3.9g/L硫酸鉀，1.5g/L硫酸鎂，50mM磷酸鹽緩沖液，pH 6.5-7.5。
6.權(quán)利要求1所述的重組枯草芽孢桿菌在醫(yī)藥領(lǐng)域制備含肝素的藥品、醫(yī)藥配制品方面的應(yīng)用。
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