[發明專利]一種同時檢測脂肪酰中性氨基酸表面活性劑中脂肪酸與活性物含量的方法

有效

• 申請號: 201611146500.1
• 申請日: 2016-12-13
• 公開（公告）號: CN106442829B
• 公開（公告）日: 2018-01-02
• 發明（設計）人: 李澤勇;湯仲標;劉康;陳磊;戶獻雷
• 申請（專利權）人: 廣州天賜高新材料股份有限公司
• 主分類號: G01N30/74
• 分類號: G01N30/74;G01N30/06
• 代理公司: 廣州華進聯合專利商標代理有限公司44224
• 代理人: 鄭彤

1.一種同時檢測脂肪酰中性氨基酸表面活性劑中脂肪酸與活性物含量的方法，其特征在于：包括如下步驟：

(1)配制脂肪酸標準溶液

配制不同濃度的脂肪酸標準溶液，其中溶劑為丙酮，溶質包括辛酸、癸酸、月桂酸、肉豆蔻酸、軟脂酸和硬脂酸；

(2)配制活性物標準溶液

配制不同濃度的活性物標準溶液，其中溶劑為丙酮，溶質包括辛酰氨基酸、癸酰氨基酸、月桂酰氨基酸、肉豆蔻酰氨基酸、軟脂酰氨基酸和硬脂酰氨基酸；

(3)制備待測溶液

準確稱取脂肪酰中性氨基酸表面活性劑于容量瓶中，加入體積濃度為80-85％的丙酮水溶液，然后加入無機酸，定容，得預處理液；

將所述預處理液經C18柱吸附，然后用體積濃度為18-22％的乙腈水溶液洗滌，再真空抽干乙腈水溶液；

用丙酮洗脫吸附后的所述C18柱，收集洗脫液，得所述待測溶液；

(4)衍生化

準確移取所述脂肪酸標準溶液、所述活性物標準溶液或所述待測溶液于碘量瓶中，加入衍生化試劑溶液和催化劑溶液，于88-92℃下回流20-40min，再加入乙酸溶液繼續回流20-40min，冷卻后用氮氣吹干，用丙酮定容，得脂肪酸標準溶液衍生化樣品、活性物標準溶液衍生化樣品或待測溶液衍生化樣品；

所述衍生化試劑溶液的摩爾濃度為0.04-0.06M，其中衍生化試劑選自2-溴代苯乙酮、2,4’-二溴苯乙酮、2-溴-4’-甲氧基苯乙酮或2-溴代苯丙酮，其中溶劑為乙腈；每ml所述標準溶液或每ml所述待測溶液加入2-4ml所述衍生化試劑溶液；

所述催化劑溶液的摩爾濃度為0.4-0.6M，其中催化劑選自三乙胺、吡啶、2,6-二甲基吡啶或4-(二甲氨基)吡啶，每ml所述標準溶液或每ml所述待測溶液加入4-6ml所述催化劑溶液；

(5)測定

精確吸取所述脂肪酸標準溶液衍生化樣品，采用HPLC進行測定，根據檢測結果繪制脂肪酸標準曲線；

精確吸取所述活性物標準溶液衍生化樣品，采用HPLC進行測定，根據檢測結果繪制活性物標準曲線；

所述HPLC的色譜條件如下：

色譜柱：C18柱；柱溫25-35℃；檢測波長244±5nm；

流動相A：體積比為0.1％的甲酸水溶液；

流動相B：體積比為55:45的甲醇/乙腈混合溶液，其中含有體積比為0.05％的甲酸；

梯度洗脫程序：0-15min，流動相A的體積百分含量由35±3％減至20±3％；15-20min，流動相A的體積百分含量保持20±3％；20-40min，流動相A的體積百分含量由20±3％減至0％；40-45min，流動相A的體積百分含量保持0％；45-50min，流動相A的體積百分含量增至35±3％；流速為0.8-1.2ml/min；

精確吸取所述待測溶液衍生化樣品，采用HPLC進行測定，根據檢測結果以及所述脂肪酸標準曲線和所述活性物標準曲線計算樣品中的脂肪酸與活性物含量。

2.根據權利要求1所述的同時檢測脂肪酰中性氨基酸表面活性劑中脂肪酸與活性物含量的方法，其特征在于，所述脂肪酰中性氨基酸表面活性劑選自：脂肪酰肌氨酸、脂肪酰肌氨酸鹽、脂肪酰甘氨酸、脂肪酰甘氨酸鹽、脂肪酰丙氨酸或脂肪酰丙氨酸鹽。

3.根據權利要求1所述的同時檢測脂肪酰中性氨基酸表面活性劑中脂肪酸與活性物含量的方法，其特征在于，步驟(1)中所述脂肪酸標準溶液中辛酸、癸酸、月桂酸、肉豆蔻酸、軟脂酸和硬脂酸的濃度均分別為5-500mg/L。

4.根據權利要求1所述的同時檢測脂肪酰中性氨基酸表面活性劑中脂肪酸與活性物含量的方法，其特征在于，步驟(2)中所述活性物標準溶液中辛酰氨基酸、癸酰氨基酸、月桂酰氨基酸、肉豆蔻酰氨基酸、軟脂酰氨基酸和硬脂酰氨基酸的濃度均分別為5-500mg/L。

5.根據權利要求1所述的同時檢測脂肪酰中性氨基酸表面活性劑中脂肪酸與活性物含量的方法，其特征在于，步驟(3)中所述無機酸選自鹽酸、硫酸、磷酸及硝酸。

6.根據權利要求1所述的同時檢測脂肪酰中性氨基酸表面活性劑中脂肪酸與活性物含量的方法，其特征在于，所述乙酸溶液的摩爾濃度為0.6-0.7M。