[發明專利]一種檢測聚丙烯酰胺凝膠中DNA的銀染試劑盒及其應用有效
| 申請號： | 201611144993.5 | 申請日： | 2016-12-13 |
| 公開（公告）號： | CN106596232B | 公開（公告）日： | 2019-04-30 |
| 發明（設計）人： | 郭培國;李榮華;劉文杰;夏巖石 | 申請（專利權）人： | 廣州大學 |
| 主分類號： | G01N1/30 | 分類號： | G01N1/30;G01N27/447 |
| 代理公司： | 廣州市天河廬陽專利事務所(普通合伙) 44244 | 代理人： | 胡濟元;張祖華 |
| 地址： | 510006 廣東*** | 國省代碼： | 廣東;44 |
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| 摘要： | |||
| 搜索關鍵詞： | 一種 檢測 聚丙烯酰胺 凝膠 dna 試劑盒 及其 應用 | ||
1.一種檢測聚丙烯酰胺凝膠中DNA的銀染試劑盒，該試劑盒包括：
試劑A：該試劑為水溶液，且每一升該水溶液中具有冰醋酸3～5mL、硝酸銀1～3g和乙醇50～100mL；
試劑B：該試劑為水溶液，且每一升該水溶液中具有氯化鈉0.5～1g、亞硫酸鈉0.5～2.5g、碳酰肼0.1～0.3g、碳酸鈉2～10g和葡萄糖5～10g；
試劑C：該試劑為水溶液，且每一升該水溶液中具有冰醋酸3～5mL。
2.一種獲取DNA聚丙烯酰胺凝膠染色圖片的方法，該方法包括以下步驟：
(1)取膠：取下PCR擴增產物經聚丙烯酰胺凝膠電泳后的膠板，輕輕揭去具凹槽的玻璃板，保留附著有聚丙烯酰胺凝膠的另一玻璃板；
(2)銀染：將附著有聚丙烯酰胺凝膠的玻璃板放置在托盆中，并使其附著有聚丙烯酰胺凝膠的一面向上，然后加入權利要求1所述的試劑A浸泡；將托盆置于振蕩器上，按每分鐘30～60次的頻率振蕩8～15分鐘后取出，用水沖洗3～5秒；
(3)顯色：將銀染后的玻璃板放置在托盆中，并使其附著有聚丙烯酰胺凝膠的一面向上，然后先加入權利要求1所述的試劑B，再將托盆置于振蕩器上，按每分鐘10～30次的頻率振蕩至能清晰觀察出凝膠中DNA條帶時取出；
(4)終止：將顯色后的玻璃板放置在托盆中，并使其附著有聚丙烯酰胺凝膠的一面向上，然后先加入權利要求1所述的試劑C，再將托盆置于振蕩器上，按每分鐘30～60次的頻率振蕩1～2分鐘取出，用水沖洗3～5秒；
(5)獲取聚丙烯酰胺凝膠染色圖片：將經步驟(4)處理后的玻璃板晾干，用掃描儀掃描便獲得聚丙烯酰胺凝膠圖片。
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