[發(fā)明專利]多表位測(cè)定

有效

• 申請(qǐng)?zhí)枺?/td>: 201611143352.8
• 申請(qǐng)日: 2011-06-14
• 公開（公告）號(hào): CN106771219B
• 公開（公告）日: 2020-04-07
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: G·薩瓦特;M·W·J·普林斯;T·H·埃弗斯;W·M·哈德曼;J·G·奧塞爾
• 申請(qǐng)（專利權(quán)）人: 皇家飛利浦電子股份有限公司
• 主分類號(hào): G01N33/577
• 分類號(hào): G01N33/577
• 代理公司: 永新專利商標(biāo)代理有限公司 72002
• 代理人: 王健

1.一種前列腺特異性抗原(PSA)檢測(cè)組件在制備在親和力測(cè)定中檢測(cè)PSA的試劑盒中的用途，所述檢測(cè)組件包括PSA-10抗體捕獲部分、PSA-36抗體捕獲部分和PSA-66抗體捕獲部分，其中試劑與PSA-36抗體捕獲部分結(jié)合，并且其中所述PSA-66抗體捕獲部分允許與檢測(cè)表面直接或間接結(jié)合，從而使得能夠檢測(cè)，其中所述PSA-10抗體捕獲部分粘附至磁性顆粒，其中所述PSA-10抗體捕獲部分通過(guò)接頭與所述磁性顆粒連接，所述接頭包含DNA接頭，所述DNA接頭由48個(gè)堿基對(duì)的雙鏈DNA隨后10個(gè)堿基的單鏈DNA組成，其中DNA是DNAse可消化的且是用EcoRI可切割以特異性洗脫的，通過(guò)包括以下步驟的方法檢測(cè)所述PSA：

a)提供包含濃度為4-10ng/ml的所述PSA的生物學(xué)樣品體積；

b)將PSA-10抗體捕獲部分加入所述生物學(xué)樣品體積，其中所述PSA-10抗體捕獲部分捕獲所述PSA；

c)通過(guò)磁性顆粒分離在十五分鐘的時(shí)間內(nèi)將捕獲的PSA濃縮為小于5μL的洗脫體積，所述洗脫體積比步驟a)中的生物學(xué)樣品體積小至少80倍；

d)用DNAse或EcoRI從所述磁性顆粒切割所述PSA-10抗體捕獲部分；

e)以?shī)A心親和力測(cè)定形式直接或間接檢測(cè)和/或定量所述PSA，其中所述PSA與PSA-36抗體捕獲部分和PSA-66抗體捕獲部分結(jié)合，所述PSA-36抗體捕獲部分與試劑結(jié)合，所述PSA-66抗體捕獲部分允許在檢測(cè)表面上再捕獲所述PSA。

2.權(quán)利要求1所述的用途，其中在步驟e)中，所述PSA與進(jìn)一步的捕獲部分結(jié)合。

3.權(quán)利要求1所述的用途，其中與PSA-36抗體捕獲部分結(jié)合的試劑選自：

放射性同位素；

固相；

熒光、磷光和/或化學(xué)發(fā)光染料；或

聚合物或大分子。

4.權(quán)利要求1所述的用途，其中與PSA-36抗體捕獲部分結(jié)合的試劑選自：

酶和/或酶底物；

核酸序列、肽；或

膠體或納米顆粒。

5.權(quán)利要求3所述的用途，其中所述固相是磁珠或乳膠珠。

6.權(quán)利要求3所述的用途，其中所述聚合物或大分子是樹狀聚體或脂質(zhì)體。

7.權(quán)利要求1-6中任一項(xiàng)所述的用途，其中所述檢測(cè)和/或定量方法選自：

-光學(xué)檢測(cè)；

-酶反應(yīng)；

-核酸擴(kuò)增技術(shù)；

-磁性檢測(cè)；

-聲波檢測(cè)；或

-電檢測(cè)。

8.權(quán)利要求7所述的用途，其中所述光學(xué)檢測(cè)選自熒光、磷光、化學(xué)發(fā)光、吸收、散射、成像、瞬逝場(chǎng)技術(shù)、FTIR、表面等離子共振、拉曼或光譜學(xué)。

9.權(quán)利要求7所述的用途，其中所述核酸擴(kuò)增技術(shù)是免疫-PCR或滾環(huán)擴(kuò)增。

10.權(quán)利要求7所述的用途，其中所述磁性檢測(cè)通過(guò)磁致電阻、霍爾效應(yīng)或線圈進(jìn)行。

11.權(quán)利要求7所述的用途，其中所述聲波檢測(cè)選自表面聲波、體聲波、懸臂或石英晶體。

12.權(quán)利要求7所述的用途，其中所述電檢測(cè)選自電導(dǎo)、阻抗、電流、氧化還原循環(huán)或電荷。

13.權(quán)利要求1-5中任一項(xiàng)所述的用途，其中所述試劑為磁珠，并且所述PSA與進(jìn)一步的捕獲部分結(jié)合。