[發明專利]一種具有殺菌活性的仿刺參肽聚糖識別蛋白及其制備方法和應用有效
| 申請號: | 201611143071.2 | 申請日: | 2016-12-07 |
| 公開(公告)號: | CN106749588B | 公開(公告)日: | 2019-03-29 |
| 發明(設計)人: | 孔令明;叢海燕 | 申請(專利權)人: | 山東大學 |
| 主分類號: | C07K14/435 | 分類號: | C07K14/435;C12N15/70;A61K38/17;A61P31/04;A23K20/147 |
| 代理公司: | 濟南圣達知識產權代理有限公司 37221 | 代理人: | 趙妍 |
| 地址: | 264209 山東*** | 國省代碼: | 山東;37 |
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| 摘要: | |||
| 搜索關鍵詞: | 肽聚糖識別蛋白 仿刺參 金黃色葡萄球菌 制備方法和應用 大腸桿菌 殺菌活性 分子生物學領域 基因工程技術 枯草芽孢桿菌 新型廣譜抗菌 氨基酸序列 飼料添加劑 凝集 燦爛弧菌 體外重組 藥物開發 重組蛋白 應用 開發 | ||
1.一種具有殺菌活性的仿刺參肽聚糖識別蛋白,其特征在于,所述仿刺參肽聚糖識別蛋白AJ-PGRP為序列表SEQ ID NO.1中氨基酸序列所示。
2.如權利要求1所述的一種肽聚糖識別蛋白AJ-PGRP的制備方法,其特征在于,制備方法如下:
(1)以仿刺參cDNA為模板,用引物F1和R1進行PCR擴增,待用;
(2)PCR產物經純化后與載體pEASY-E1載體進行連接,連接產物轉化大腸桿菌,測序鑒定重組子;
(3)將表達載體pEASY-AJ-PGRP轉入Trans BL21(DE3)化學感受態細胞,篩選轉化子,將轉化子接種于含有氨芐青霉素的LB培養基中,用IPTG誘導表達,而后用親和層析柱純化重組蛋白,即得到序列表SEQ ID No.1中氨基酸序列的肽聚糖識別蛋白AJ-PGRP;
所述引物分別為:F1:5’-ATGGATGAACCGCCGCGTGCCTT-3’,R1:5’-ATGGTGATGTATAATTTCTTG-3’。
3.如權利要求1所述的一種具有殺菌活性的仿刺參肽聚糖識別蛋白的應用,其特征在于,所述序列表SEQ ID NO.1中氨基酸序列的AJ-PGRP用于制備廣譜抗菌類制劑或飼料添加劑。
4.如權利要求1所述的一種具有殺菌活性的仿刺參肽聚糖識別蛋白的應用,其特征在于,所述序列表SEQ ID NO.1中氨基酸序列的AJ-PGRP用于制備抗金黃色葡萄球菌、大腸桿菌、燦爛弧菌和枯草芽孢桿菌的制劑。
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