[發明專利]通過程序降溫制備體內止血敷料的方法

有效

• 申請號: 201611142040.5
• 申請日: 2016-12-12
• 公開（公告）號: CN106729958B
• 公開（公告）日: 2020-06-09
• 發明（設計）人: 范代娣;米鈺;惠俊峰;馬曉軒;馬沛;段志廣;劉琳
• 申請（專利權）人: 西北大學
• 主分類號: A61L26/00
• 分類號: A61L26/00;A61L24/10;A61L24/00
• 代理公司: 西安西達專利代理有限責任公司 61202
• 代理人: 謝鋼

本專利公開了一種體內止血敷料的制備方法，該制備方法以類人膠原蛋白為原料，加入注射用水攪拌溶解后，通過設定特定的降溫速度實現冷凍進行精確降溫預凍，并真空冷凍干燥，后經過熱交聯后，Co60照射滅菌，最終獲得一種體內止血敷料。本發明制備方法本發明所制備的體內止血敷料安全性高，生物相容性好，止血效果顯著，可用作各類創面止血和術后止血，在醫用生物材料與組織工程等相關領域有著良好的應用前景。

技術領域

本發明涉及一種體內止血敷料的制備方法，特別涉及一種通過程序降溫制備體內止血敷料的方法，屬于生物醫用材料領域。

背景技術

膠原蛋白是一種高分子蛋白，一般呈白色、不透明的纖維狀。它是生物體組成結構的主要成分之一，廣泛地分布于動物的皮膚、骨骼和肌肉組織內。膠原具有止血性能，一方面可加強血小板的黏附和聚集形成血栓，阻止血液流出。另一方面，通過激活和誘導各種凝血因子還可啟動內源性的凝血途徑。但是膠原蛋白多來源于動物皮、筋腱等，可加工性差，在提取過程中會使蛋白部分生物活性喪失，而且其對人體而言屬于一種異源物，可引起過敏等不良反應，應用于人體非常容易產生排異反應。因此需要尋找一種制備簡單、安全性高的膠原蛋白作為原料。

目前關于膠原蛋白止血材料的制備過程中采用最多的就是真空冷凍干燥，然而，在真空凍干前預凍階段的工藝，目前并沒有進行深入的研究和優化，導致制備的止血材料表面不平整、孔徑不均一和上下表面明顯差異等物化性能上的缺陷，影響止血材料對創面滲血的吸收，以及與血液中血小板和凝血因子之間的作用，導致最終海綿臨床止血時間較長，功效較差，如專利CN 200610041913。

發明內容

本發明的目的是提供一種使用安全、可吸收、止血效果好的體內止血敷料的制備方法。

本發明的實現過程如下：

一種體內止血敷料的制備方法，步驟如下：以類人膠原蛋白為原料，加入注射用水攪拌溶解后，在預凍過程中，控制降溫速率為4-8℃/min，降至-40-—-80℃，然后進行真空冷凍干燥，再經過熱交聯后，Co60照射滅菌，最終獲得體內止血敷料。

所述的類人膠原蛋白為使用基因重組大腸桿菌高密度發酵生產的一種人源型膠原蛋白，人膠原蛋白加入注射用水攪拌溶解后，溶液中類人膠原蛋白的質量濃度為1% -5%；所述真空冷凍干燥24-48 h，真空冷凍干燥好的樣品進行交聯，交聯溫度為100℃-150℃，交聯時間為24h - 96h。

本發明具體實施過程如下：

（1）將類人膠原蛋白溶解于注射用水中，攪拌使其完全溶解，使溶液中類人膠原蛋白的質量濃度為1% -5%，所述的類人膠原蛋白為使用基因重組大腸桿菌高密度發酵生產的一種人源型膠原蛋白；

（2）將溶液移入一次性無菌培養皿或模具中，每皿或每模具7-15 mL；

（3）使用程序冷凍儀進行預凍，降溫速率為4-8℃/min，降至-40-—-80℃；

（4）在真空冷凍干燥機中凍干樣品24-48 h；

（5）將凍干好的樣品置于真空干燥箱進行交聯中，調節交聯溫度為100℃-150℃，交聯時間為24h - 96h；

（6）輻照滅菌10-30h。