[發明專利]蘆薈苷的偶聯物及其制備方法與應用在審
| 申請號： | 201611136272.X | 申請日： | 2016-12-07 |
| 公開（公告）號： | CN108164599A | 公開（公告）日： | 2018-06-15 |
| 發明（設計）人： | 郗日沫;鄧川;尹永梅;孟萌;李小剛;龍浩 | 申請（專利權）人： | 南開大學 |
| 主分類號： | C07K14/795 | 分類號： | C07K14/795;C07K1/107;C07K16/44;C07K16/06 |
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| 地址： | 300350 天津*** | 國省代碼： | 天津;12 |
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| 摘要： | |||
| 搜索關鍵詞： | 蘆薈苷 偶聯物 制備 鑰匙孔 免疫原性 載體物質 蛋白 動物免疫系統產生抗體 酶聯免疫檢測試劑盒 免疫新西蘭 蛋白分子 大白兔 抗血清 偶聯 效價 應用 誘發 檢測 | ||
1.一種蘆薈苷的偶聯物，由蘆薈苷半抗原與產生免疫原性的載體物質偶聯而成，所述載體物質為優選蛋白質，蛋白片段，合成多肽或半合成多肽。
2.如權利要求1所述的蘆薈苷的偶聯物，其中所述產生免疫原性的載體物質是鑰匙孔藍蛋白。
3.如權利要求2所述的蘆薈苷的偶聯物，其結構通式如(I)
其中，n為與一個鑰匙孔藍蛋白結合的蘆薈苷的分子個數，KLH為鑰匙孔藍蛋白(Keyhole Limpet Hemocyanin)，分子量范圍是450KDa～13000KDa；
上述偶聯物顯示出如下物化特征：
(1)外觀：桔黃色粉末狀固體；
(2)紫外吸收光譜：374nm。
4.如權利要求1～3中任一項所述的蘆薈苷的偶聯物的制備方法，其特征是：將蘆薈苷與產生免疫原性的載體物質連接起來，結合為具有誘發動物免疫系統產生抗體的偶聯物，并保持該偶聯物的生物活性不變。
5.如權利要求4所述的蘆薈苷的偶聯物的制備方法，由如下步驟完成：
(1)溶液A的制備：將10.0mg小分子化合物蘆薈苷溶解于冰醋酸中，加入含有5.1mg高碘酸鈉溶液0.5ml，室溫下避光攪拌反應1h；
(2)溶液B的制備：將30mg KLH溶于10ml 0.05M碳酸鹽緩沖溶液(CBS)中，備用；
(3)將溶液A逐滴加入溶液B中，在室溫下避光攪拌反應6h，得溶液C；
(4)溶液C轉移到透析袋中，用濃度為0.01M磷酸鹽緩沖液(PBS)攪拌透析72h，之后更換用蒸餾水透析20～30h，每6h更換一次透析液，透析過程在4℃下進行；
(5)凍干透析液，得到桔黃色蘆薈苷的偶聯物。
6.如權利要求5所述的蘆薈苷的偶聯物的制備方法，其特征是：步驟(1)所述的蘆薈苷與高碘酸鈉摩爾比為1∶1。
7.如權利要求5所述的蘆薈苷的偶聯物的制備方法，其特征是：步驟(2)所述的蘆薈苷與鑰匙孔藍蛋白的質量數比為1∶3。
8.權利要求1～3中任一項所述的蘆薈苷的偶聯物作為免疫原在制備蘆薈苷特異反應抗體中的應用。
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