[發(fā)明專利]一種輔助鑒定大豆百粒重性狀的分子標(biāo)記HNUSOY05及其應(yīng)用

有效

• 申請?zhí)枺?/td>: 201611128420.3
• 申請日: 2016-12-09
• 公開（公告）號: CN106755368B
• 公開（公告）日: 2020-09-04
• 發(fā)明（設(shè)計）人: 束永俊;趙金月;李巍;劉贏
• 申請（專利權(quán)）人: 哈爾濱師范大學(xué)
• 主分類號: C12Q1/6895
• 分類號: C12Q1/6895;C12N15/11
• 代理公司: 哈爾濱市陽光惠遠知識產(chǎn)權(quán)代理有限公司 23211
• 代理人: 鄧宇

本發(fā)明公開了一種輔助鑒定大豆百粒重性狀的分子標(biāo)記HNUSOY05及其應(yīng)用，屬于作物遺傳育種技術(shù)領(lǐng)域。該分子標(biāo)記表現(xiàn)為SEQ ID NO.1所示核苷酸序列在大豆11號染色體的1001963至1002153區(qū)間內(nèi)插入/缺失長度多態(tài)性；具有SEQ ID NO.1所示核苷酸序列的大豆表現(xiàn)為高百粒重；缺失SEQ ID NO.1所示核苷酸序列的大豆表現(xiàn)為低百粒重。該分子標(biāo)記以及鑒定方法能夠用于大豆選育，尤其是用于輔助鑒定、篩選大豆的百粒重性狀。該方法操作簡單、費用低、精確度高，可實現(xiàn)快速檢測，將極大地提高了大豆百粒重性狀的選育效率，在高產(chǎn)大豆品種的培育過程中具有重要應(yīng)用價值。

技術(shù)領(lǐng)域

本發(fā)明涉及一種輔助鑒定大豆百粒重性狀的分子標(biāo)記HNUSOY05及其應(yīng)用，屬于作物遺傳育種技術(shù)領(lǐng)域。

背景技術(shù)

大豆是世界上重要的經(jīng)濟與糧食作物，是食用油和植物蛋白的主要來源之一，因此，大豆的遺傳改良工作一直受到遺傳學(xué)和育種學(xué)工作者的重點關(guān)注。其中，產(chǎn)量性狀具有重要的經(jīng)濟價值，成為人們改良的熱點問題。大豆籽粒百粒重是其產(chǎn)量性狀構(gòu)成的重要因素，與產(chǎn)量呈現(xiàn)正相關(guān)，是高產(chǎn)大豆選育過程中重要的選育對象。但是，大豆籽粒百粒重性狀是一個遺傳力較高的數(shù)量性狀，受多基因控制，表型選育方式效率較低，且易受環(huán)境影響，不穩(wěn)定。隨著大豆公共遺傳連鎖圖譜的不斷完善，已有很多遺傳學(xué)和育種學(xué)工作者通過QTL定位等方式發(fā)現(xiàn)了230多個籽粒百粒重性狀相關(guān)的QTL。然后，這些已經(jīng)公布的QTL多采用SSR類分子標(biāo)記定位，在大豆選育過程中，實驗操作復(fù)雜，時間和人力成本較高。同時，由于大豆是嚴(yán)格自花授粉作物、且花期分散，導(dǎo)致不同大豆種質(zhì)間遺傳背景差異較大。通過QTL定位方式發(fā)掘的籽粒百粒重性狀的分子標(biāo)記對遺傳背景依賴程度高，對相同遺傳材料(即具有相同遺傳背景的大豆群體)，或相近遺傳材料，具有良好的鑒定和選擇作用，而對遺傳背景差異較大的育種材料檢出效率較差，推廣范圍有限，實際應(yīng)用程度不高。

發(fā)明內(nèi)容

為解決現(xiàn)有技術(shù)的不足，本發(fā)明提供了一種輔助鑒定大豆百粒重性狀的分子標(biāo)記HNUSOY05，采用的技術(shù)方案如下：

本發(fā)明的一個目的在于提供一種輔助鑒定大豆百粒重性狀的分子標(biāo)記HNUSOY05，所述分子標(biāo)記表現(xiàn)為SEQ ID NO.1所示核苷酸序列在大豆11號染色體的1001963至1002153區(qū)間內(nèi)插入/缺失長度多態(tài)性；具有SEQ ID NO.1所示核苷酸序列的大豆表現(xiàn)為高百粒重；缺失SEQ ID NO.1所示核苷酸序列的大豆表現(xiàn)為低百粒重。

該分子標(biāo)記HNUSOY05的片段長度為191bp，核苷酸序列如SEQ ID NO.1。

本發(fā)明還提供了一種所述分子標(biāo)記HNUSOY05在大豆遺傳育種、大豆百粒重性狀輔助鑒定、大豆百粒重性狀篩選中的應(yīng)用。

本發(fā)明的另一目的是提供一種所述分子標(biāo)記HNUSOY05的引物對，所述引物對的上游引物HNUSOY05F的核苷酸序列如SEQ ID NO.2所示，下游引物HNUSOY05R的核苷酸序列如SEQ ID NO.3所示。

本發(fā)明還提供了一種所述分子標(biāo)記HNUSOY05的引物對在大豆遺傳育種、大豆百粒重性狀輔助鑒定、大豆百粒重性狀篩選中的應(yīng)用。

本發(fā)明的再一目的是提供一種利用分子標(biāo)記HNUSOY05鑒定大豆百粒重性狀的方法，該方法是以待測大豆基因組DNA為模板，利用權(quán)利要求3所述分子標(biāo)記HNUSOY05的引物對進行PCR擴增；擴增產(chǎn)物采用瓊脂糖凝膠電泳檢測；若檢測得到長度為637bp的單一片段，則待測大豆品種具有高百粒重性狀；若檢測得到長度為446bp的單一片段，則待測大豆品種具有低百粒重性狀。

本發(fā)明中所述高百粒重是指籽粒的百粒重≥20.0克；所述低百粒重是指籽粒百粒重≤12.0克。

優(yōu)選地，所述方法，具體步驟如下：

1)提取待檢測大豆樣品中的基因組DNA；