[發明專利]一種同時測定食用植物油中三種毒性醛類的雙波長檢測方法

有效

• 申請號: 201611126276.X
• 申請日: 2016-12-09
• 公開（公告）號: CN106645471B
• 公開（公告）日: 2019-06-18
• 發明（設計）人: 劉國琴;馬路凱
• 申請（專利權）人: 華南理工大學
• 主分類號: G01N30/02
• 分類號: G01N30/02;G01N30/06
• 代理公司: 廣州粵高專利商標代理有限公司 44102
• 代理人: 何淑珍

1.一種同時測定食用植物油中三種毒性醛類的雙波長檢測方法，其特征在于，一次進樣，雙波長同時檢測食用植物油中三種毒性醛類丙二醛、4-羥基己烯醛和4-羥基壬烯醛；所述雙波長分別是波長為310nm和378nm；所述丙二醛、4-羥基己烯醛和4-羥基壬烯醛的檢測限分別為0.012 μg/g、0.020 μg/g和0.014 μg/g；所述丙二醛、4-羥基己烯醛和4-羥基壬烯醛的加標回收率分別為98.13-102.94%、97.73-101.73%和97.66-102.83%；所述丙二醛、4-羥基己烯醛和4-羥基壬烯醛的檢測線性 范圍分別為0.02-10.0μg/g、0.02-4.00μg/g和0.03-4.00μg/g；具體包括如下檢測步驟：

（1）衍生劑的配制：配制0.05 mol/L 2,4-二硝基苯肼的酸性乙醇溶液，內含為10-15v/v%的濃鹽酸；

（2）標準溶液的配制：準確稱取1,1,3,3-四乙氧基丙烷，定容后稀釋為10 μg/mL MDA標準品溶液，再依次配制MDA標準溶液濃度為0.02、0.05、0.1、0.5、1、2、5、10μg/mL；分別取4-羥基己烯醛和4-羥基壬烯醛的標準品溶液，依次配制4-HNE標準溶液濃度為0.02、0.05、0.1、0.5、1、2、3、4μg/mL，4-HHE標準溶液濃度為0.03、0.05、0.1、0.5、1、2、3、4μg/mL，備用；

（3）樣品衍生溶液的制備：取油樣，加入30 v/v %-70 v/v %乙醇的水溶液，得到濃度為0.1~1.0 g/mL的樣品溶液，渦旋震蕩3-10 min，3000-5000×g離心5-10 min后收集下層清液，再對油層重復上述步驟各一次，合并兩次收集的下層清液；加入體積比為0.1~1.0配制的衍生劑，渦旋1-5 min充分混勻，40-80℃避光水浴加熱1.5-3.5h，冰浴快速冷卻，加入二氯甲烷溶液溶解，渦旋震蕩1-5min，3000-5000×g離心5-10 min，收集下層溶液，氮吹濃縮，最后加入甲醇或乙腈或初始流動相復溶，得到樣品衍生溶液；

丙二醛、4-羥基己烯醛和4-羥基壬烯醛的標準溶液以及樣品同步衍生化，過0.45μm或0.22μm濾膜，上機進樣分析；

（4）色譜條件

色譜柱：C18色譜柱4.6×250mm，內徑5μm；

檢測器：二極管陣列檢測器；

檢測波長：雙通道檢測，通道一：310nm，通道二：378nm；

流動相：乙腈和水梯度洗脫v/v，洗脫條件為：

0-18 min，乙腈：水=45:55；

18-23 min，乙腈：水=（45→70）：（55→30）；

23-30 min，乙腈：水=70:30；

流速：0.6-1.2 mL/min；

柱溫：25-35 ℃；

進樣量：10-40 μL；

（5）將樣品溶液的保留時間與標準溶液的保留時間進行對比，獲得峰面積代入標準曲線，實現對丙二醛、4-羥基己烯醛和4-羥基壬烯醛的定量。