[發(fā)明專利]一種褐藻寡糖單體的制備方法及褐藻寡糖

有效

• 申請(qǐng)?zhí)枺?/td>: 201611126053.3
• 申請(qǐng)日: 2016-12-08
• 公開(kāi)（公告）號(hào): CN106755188B
• 公開(kāi)（公告）日: 2020-04-14
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 李莉莉;秦松;翟詩(shī)翔;劉正一;焦緒棟
• 申請(qǐng)（專利權(quán)）人: 中國(guó)科學(xué)院煙臺(tái)海岸帶研究所
• 主分類號(hào): C12P19/12
• 分類號(hào): C12P19/12;C12P19/04;C12P19/00;C07H3/04;C07H3/06;C12R1/07
• 代理公司: 深圳市科進(jìn)知識(shí)產(chǎn)權(quán)代理事務(wù)所(普通合伙) 44316
• 代理人: 趙勍毅

本發(fā)明提供了一種褐藻寡糖單體的制備方法，采用酶解法降解褐藻或褐藻膠得到酶解液，再將所述酶解液分離純化得到包括甘露糖醛酸二糖及甘露糖醛酸三糖等褐藻寡糖單體，由于本發(fā)明采用酶解法降解褐藻，與傳統(tǒng)的化學(xué)法相比條件溫和，制備過(guò)程潔凈環(huán)保，無(wú)有害化學(xué)物質(zhì)的添加和殘留，且工藝簡(jiǎn)單。

技術(shù)領(lǐng)域

本發(fā)明涉及食品加工領(lǐng)域，尤其涉及一種褐藻寡糖單體的制備方法。

背景技術(shù)

褐藻寡糖是褐藻膠的寡聚物，在農(nóng)業(yè)、食品及醫(yī)藥領(lǐng)域有著十分重要的應(yīng)用價(jià)值。研究表明，在植物方面，褐藻寡糖混合物能夠調(diào)節(jié)多種植物的生長(zhǎng)功能，延長(zhǎng)植物的生命周期，增強(qiáng)植物的免疫功能，在植物增產(chǎn)及抗病方面具有重大的意義。在動(dòng)物方面，褐藻寡糖能促進(jìn)多種動(dòng)物生長(zhǎng)，提高多種動(dòng)物體內(nèi)免疫細(xì)胞的數(shù)量，降低消化道和畜產(chǎn)品中的有害細(xì)菌的數(shù)量，對(duì)細(xì)胞的生長(zhǎng)和增殖具有一定的促進(jìn)和調(diào)節(jié)作用。在動(dòng)物增產(chǎn)及提高肉類品質(zhì)方面具有重大的意義。

自然界中褐藻寡糖分布十分廣泛，在植物和微生物中都發(fā)現(xiàn)有褐藻寡糖的存在。褐藻寡糖在海藻膠中含量極高。海藻膠是從海帶、馬尾藻等海藻中提取的直鏈多糖類化合物，糖鏈由L-古羅糖醛酸(G)和D-甘露糖醛酸(M)組成。其鏈由M和G的組合方式不同，可分為α-(1→4)糖苷鍵連接聚古羅糖醛酸(PG)、β-(1→4)糖苷鍵連接的聚甘露糖醛酸(PM)和甘露糖醛酸與古羅糖醛酸鑲嵌片段(MG或GM)。由海藻膠制備寡糖的傳統(tǒng)方法主要有化學(xué)氧化法、物理降解法和酶解法。化學(xué)氧化法制備條件較劇烈，且制備中會(huì)產(chǎn)生大量的工業(yè)三廢，同時(shí)產(chǎn)品中的殘留物質(zhì)能對(duì)農(nóng)作物、牲畜及人體都會(huì)造成損害。而物理降解法存在著降解效率低，產(chǎn)品成本高等問(wèn)題。

目前，生物酶解法因?yàn)闂l件溫和，副產(chǎn)物少，環(huán)境友好等特點(diǎn)被廣為接受，其中褐藻酶解產(chǎn)品在農(nóng)業(yè)領(lǐng)域應(yīng)用最為廣泛。但是褐藻酶解產(chǎn)品中的活性物質(zhì)褐藻寡糖檢測(cè)難的問(wèn)題，影響了對(duì)其產(chǎn)品的評(píng)價(jià)和推廣應(yīng)用。而解決這一問(wèn)題的關(guān)鍵就是褐藻寡糖標(biāo)準(zhǔn)品的制備。褐藻酶解產(chǎn)物中不僅有古羅糖醛酸寡糖，還有甘露糖醛酸寡糖；即使同一類型的寡糖，也是由不同鏈長(zhǎng)的物理化學(xué)性質(zhì)極其相似的糖單體組成，成分的復(fù)雜性增加了糖單體分離純化的難度。

發(fā)明內(nèi)容

鑒于此，有必要針對(duì)現(xiàn)有技術(shù)存在的缺陷，提供一種褐藻寡糖單體的制備方法。

一種褐藻寡糖單體的制備方法，包括如下步驟：

采用酶解法降解褐藻或褐藻膠得到酶解液；及

將所述酶解液分離純化得到所述褐藻寡糖單體；

所述褐藻寡糖單體包括甘露糖醛酸二糖、三糖、四糖、五糖、六糖、七糖、八糖、九糖中的一種。

在一些實(shí)施例中，采用酶解法降解褐藻或褐藻膠得到酶解液，包括下述步驟：

步驟110：將室溫狀態(tài)下的嗜糖芽孢桿菌YIC-Alg3接種于海水培養(yǎng)基中，于20-35℃溫度條件培養(yǎng)10-24h，得到活化液；

步驟120：取適量的所述活化液接種于Alg培養(yǎng)基中，培養(yǎng)20-30h，得到發(fā)酵液；

步驟130：將所述發(fā)酵液離心處理，取上清液加入硫酸銨至飽和度為75％-85％，靜置12-24h后再恒溫離心處理，獲取沉淀物；

步驟140：將所述沉淀物用磷酸鹽緩沖液充分溶解后，于0-4℃溫度條件下離心處理，得到的上清液即為粗酶液；

步驟150：將所述粗酶液添加于褐藻漿液或褐藻膠溶液中，并于30-45℃搖床內(nèi)酶解20-30h后再離心處理，取上清液，得到所述酶解液。

在一些實(shí)施例中，步驟110中，所述嗜糖芽孢桿菌YIC-Alg3的保藏單位名稱為中國(guó)普通微生物菌種保藏管理中心，保藏日期為2016年03月02日，保藏號(hào)為CGMCC NO 12155。