[發明專利]一種褐藻寡糖單體的制備方法及褐藻寡糖

有效

• 申請號: 201611126053.3
• 申請日: 2016-12-08
• 公開（公告）號: CN106755188B
• 公開（公告）日: 2020-04-14
• 發明（設計）人: 李莉莉;秦松;翟詩翔;劉正一;焦緒棟
• 申請（專利權）人: 中國科學院煙臺海岸帶研究所
• 主分類號: C12P19/12
• 分類號: C12P19/12;C12P19/04;C12P19/00;C07H3/04;C07H3/06;C12R1/07
• 代理公司: 深圳市科進知識產權代理事務所(普通合伙) 44316
• 代理人: 趙勍毅

本發明提供了一種褐藻寡糖單體的制備方法，采用酶解法降解褐藻或褐藻膠得到酶解液，再將所述酶解液分離純化得到包括甘露糖醛酸二糖及甘露糖醛酸三糖等褐藻寡糖單體，由于本發明采用酶解法降解褐藻，與傳統的化學法相比條件溫和，制備過程潔凈環保，無有害化學物質的添加和殘留，且工藝簡單。

技術領域

本發明涉及食品加工領域，尤其涉及一種褐藻寡糖單體的制備方法。

背景技術

褐藻寡糖是褐藻膠的寡聚物，在農業、食品及醫藥領域有著十分重要的應用價值。研究表明，在植物方面，褐藻寡糖混合物能夠調節多種植物的生長功能，延長植物的生命周期，增強植物的免疫功能，在植物增產及抗病方面具有重大的意義。在動物方面，褐藻寡糖能促進多種動物生長，提高多種動物體內免疫細胞的數量，降低消化道和畜產品中的有害細菌的數量，對細胞的生長和增殖具有一定的促進和調節作用。在動物增產及提高肉類品質方面具有重大的意義。

自然界中褐藻寡糖分布十分廣泛，在植物和微生物中都發現有褐藻寡糖的存在。褐藻寡糖在海藻膠中含量極高。海藻膠是從海帶、馬尾藻等海藻中提取的直鏈多糖類化合物，糖鏈由L-古羅糖醛酸(G)和D-甘露糖醛酸(M)組成。其鏈由M和G的組合方式不同，可分為α-(1→4)糖苷鍵連接聚古羅糖醛酸(PG)、β-(1→4)糖苷鍵連接的聚甘露糖醛酸(PM)和甘露糖醛酸與古羅糖醛酸鑲嵌片段(MG或GM)。由海藻膠制備寡糖的傳統方法主要有化學氧化法、物理降解法和酶解法。化學氧化法制備條件較劇烈，且制備中會產生大量的工業三廢，同時產品中的殘留物質能對農作物、牲畜及人體都會造成損害。而物理降解法存在著降解效率低，產品成本高等問題。

目前，生物酶解法因為條件溫和，副產物少，環境友好等特點被廣為接受，其中褐藻酶解產品在農業領域應用最為廣泛。但是褐藻酶解產品中的活性物質褐藻寡糖檢測難的問題，影響了對其產品的評價和推廣應用。而解決這一問題的關鍵就是褐藻寡糖標準品的制備。褐藻酶解產物中不僅有古羅糖醛酸寡糖，還有甘露糖醛酸寡糖；即使同一類型的寡糖，也是由不同鏈長的物理化學性質極其相似的糖單體組成，成分的復雜性增加了糖單體分離純化的難度。

發明內容

鑒于此，有必要針對現有技術存在的缺陷，提供一種褐藻寡糖單體的制備方法。

一種褐藻寡糖單體的制備方法，包括如下步驟：

采用酶解法降解褐藻或褐藻膠得到酶解液；及

將所述酶解液分離純化得到所述褐藻寡糖單體；

所述褐藻寡糖單體包括甘露糖醛酸二糖、三糖、四糖、五糖、六糖、七糖、八糖、九糖中的一種。

在一些實施例中，采用酶解法降解褐藻或褐藻膠得到酶解液，包括下述步驟：

步驟110：將室溫狀態下的嗜糖芽孢桿菌YIC-Alg3接種于海水培養基中，于20-35℃溫度條件培養10-24h，得到活化液；

步驟120：取適量的所述活化液接種于Alg培養基中，培養20-30h，得到發酵液；

步驟130：將所述發酵液離心處理，取上清液加入硫酸銨至飽和度為75％-85％，靜置12-24h后再恒溫離心處理，獲取沉淀物；

步驟140：將所述沉淀物用磷酸鹽緩沖液充分溶解后，于0-4℃溫度條件下離心處理，得到的上清液即為粗酶液；

步驟150：將所述粗酶液添加于褐藻漿液或褐藻膠溶液中，并于30-45℃搖床內酶解20-30h后再離心處理，取上清液，得到所述酶解液。

在一些實施例中，步驟110中，所述嗜糖芽孢桿菌YIC-Alg3的保藏單位名稱為中國普通微生物菌種保藏管理中心，保藏日期為2016年03月02日，保藏號為CGMCC NO 12155。