[發明專利]伊木薩克片作用于異常黏液質證與陽痿病證模型靶點蛋白及其篩選方法

有效

• 申請號: 201611125778.0
• 申請日: 2016-12-09
• 公開（公告）號: CN106546754B
• 公開（公告）日: 2018-05-04
• 發明（設計）人: 阿地力江·伊明
• 申請（專利權）人: 新疆醫科大學
• 主分類號: G01N33/68
• 分類號: G01N33/68
• 代理公司: 北京高沃律師事務所11569
• 代理人: 王加貴

技術領域

本發明屬于生物技術領域，具體涉及伊木薩克片作用于異常黏液質證與陽痿病證模型靶點蛋白及其篩選方法。

背景技術

維吾爾醫(維醫)學是祖國傳統醫學中重要組成部分，維醫學體液論認為，人體由膽液質、血液質、黏液質和黑膽質4種體液質組成，上述4種體液質的動態平衡是機體健康的生理基礎，而某一種體液質的量或/和質的變化，引起體液質平衡失調，產生一種異常體液質證(證候)，與多種疾病的發生存在因果關系。體液病理學(體液論)是維醫理論根基，其認為4種體液中，黏液質體液屬性濕寒，常易因生活、飲食與環境因素、工作壓力、缺乏運動等原因導致體內體液平衡遭到破壞，黏液質體液發生改變，產生異常黏液質，致代謝水平降低，產物蓄積體內，進而導致病理性改變，引發相關疾病。臨床研究證實，異常黏液質證(Abnormal Phlegm)在陽痿(陰莖勃起功能障礙)、早泄、少弱精癥、卵巢早衰、不孕不育等生殖疾病、肥胖癥、高脂血癥等代謝性疾病和心血管疾病發生過程中，處于主導地位，可能也是腫瘤、糖尿病、高血壓等復雜性疾病發生早期的主要證型。陰莖勃起功能障礙(erectile dysfunction，ED)，又稱陽痿，是指男子陰莖不能勃起及不能維持勃起而完成滿意的性生活，屬于維醫優勢病種。

伊木薩克片作為針對異常黏液質型陽痿、早泄的國藥準字號經典維藥(批號Z65020144)，以顯著的臨床療效著稱，其具有800年的歷史，且早已納入維吾爾醫學院校教材中，公認性與科學性強。其以維醫辨證論治體系為指導，廣泛用于維醫臨床，目前也已用于疆內外各大醫院男科臨床，但因其現代醫學作用機制尚不清楚，作用靶點更是未見報道，導致其在現代醫學(西醫)醫院使用中缺乏理論與使用指導，不能更好的服務于全國各族患者。

異常黏液質型陽痿病證并非是單一生殖器官即陰莖組織的的疾病，而是全身性疾病，因此需要我們用整體觀念，從全身的視野思考、研究與防治。伊木薩克片作為與異常黏液質型陽痿病證對應的復方維藥，在辯證的基礎上使用，并通過發揮補腎壯陽，填精固真之功效實現治療效果。

維醫辨證分型的起點和核心是維醫“體液論”，其出發點是人體內在體液動態變化的外在表現，而維醫藥學所推崇的辨證施治也是依據個體的整體水平上發生的體液表型差異，這與系統生物學整體研究思路不謀而合。故，本研究，本研究在建立異常黏液質證候與病證結合動物模型，并進行維藥伊木薩克片治療性干預基礎上，開展了血清和陰莖平滑肌組織的蛋白質組學研究，建立了維藥伊木薩克片治療異常黏液質證與異常黏液質型陽痿病證大鼠相關血清藥物靶點蛋白體系，為從維醫和現代醫學結合角度進一步揭示伊木薩克片作用機制，以及為基于維藥伊木薩克片的新藥開發及二次開發奠定基礎，對于維醫診療的標準化和現代化具有重要意義。

發明內容

有鑒于此，本發明的目的在于提供伊木薩克片作用于異常黏液質陽痿病證大鼠后血清和陰莖平滑肌組織藥物靶點蛋白及其篩選方法，通過采用iTRAQ技術獲得的血清和陰莖平滑肌組織的所有差異蛋白，然后通過本專利豐富的維吾爾醫學知識制定了候選差異蛋白的篩選方法。

為了實現上述發明目的，本發明提供以下技術方案：

本發明提供了伊木薩克片藥物靶點蛋白的篩選方法，包括以下步驟：

1)提供正常對照組(N組)、異常黏液質證候組(ZM組)，異常黏液質證候藥物組(ZY組)、異常黏液質型病證組(BM組)和異常黏液質型病證藥物組(BY組)，大鼠，對BY組和ZY組大鼠用伊木薩克片喂食2周，N組、ZM組和BM組大鼠喂食水；

2)采集所述步驟1)得到的五組大鼠的全血，分離后得到血清；

取所述步驟1)得到五組大鼠的陰莖平滑肌組織；

3)從所述步驟2)得到的血清和陰莖平滑肌組織中提取蛋白質，檢測，得到已知濃度的蛋白質；

4)將所述步驟3)中得到的蛋白質用iTRAQ標記試劑盒標記后純化，得到純化后肽段；

5)將所述步驟4)得到的純化后的肽段經質譜檢測后得到指紋圖譜，將所述指紋圖譜在PD軟件中篩選，將所述篩選后的譜圖用Mascot搜索，根據得到的搜索結果和篩選后的譜圖進行定量分析，將得到的分析數據在大鼠數據庫中檢索，獲得大鼠血清差異蛋白質和陰莖平滑肌組織差異蛋白質；

6)將所述步驟5)中得到的血清差異蛋白質和陰莖平滑肌組織差異蛋白質進行伊木薩克片藥物靶點蛋白的篩選。

優選的，所述伊木薩克片的藥物活性成分的質量濃度為250mg/kg，

優選的，所述喂食伊木薩克片的頻率為每日1～2次。