[發(fā)明專(zhuān)利]一種甘藍(lán)型油菜CMS恢復(fù)系的快速批量選育方法

在審

• 申請(qǐng)?zhí)枺?/td>: 201611123137.1
• 申請(qǐng)日: 2016-12-08
• 公開(kāi)（公告）號(hào): CN106613909A
• 公開(kāi)（公告）日: 2017-05-10
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 董育紅;田建華;關(guān)周博;韋世豪;鄭磊;李永紅
• 申請(qǐng)（專(zhuān)利權(quán)）人: 陜西省雜交油菜研究中心
• 主分類(lèi)號(hào): A01H1/02
• 分類(lèi)號(hào): A01H1/02;A01H1/04;A01H1/08;A01H4/00
• 代理公司: 北京方圓嘉禾知識(shí)產(chǎn)權(quán)代理有限公司11385
• 代理人: 董芙蓉

技術(shù)領(lǐng)域

本發(fā)明屬于油菜育種技術(shù)領(lǐng)域，具體涉及一種快速批量選育CMS恢復(fù)系的育種方法。

背景技術(shù)

我國(guó)幅員遼闊，自然條件復(fù)雜多樣，甘藍(lán)型油菜種植區(qū)域跨度很大。從播種時(shí)期分為春油菜區(qū)(春播區(qū))和冬油菜區(qū)(秋播區(qū))，而冬油菜區(qū)又根據(jù)氣候類(lèi)型和特點(diǎn)分為4個(gè)大區(qū)，包括長(zhǎng)江上、中、下游和黃淮區(qū)。不同生態(tài)區(qū)光照、溫度、水分、土壤等條件差別很大，而甘藍(lán)型油菜對(duì)光照、溫度、水分等氣候條件較為敏感，同一品種在不同生態(tài)區(qū)的表現(xiàn)差別很大。

目前國(guó)內(nèi)種質(zhì)資源保護(hù)手段有限，出于單位自身利益考量，各育種單位之間種質(zhì)資源交流、合作育種等很難進(jìn)行，加上長(zhǎng)期的自然進(jìn)化和人工選擇，不同單位所擁有的種質(zhì)資源，大多僅適于本生態(tài)區(qū)，導(dǎo)致跨區(qū)域品種選育難度大、效率低，限制了我國(guó)油菜產(chǎn)業(yè)的發(fā)展。目前為了跨區(qū)域品種選育，有實(shí)力的單位在目標(biāo)推廣區(qū)域建立育種基地，但這對(duì)人力、物力、財(cái)力要求較高，一般單位很難做到。另外，油菜自身的性狀遺傳具有一定的保守性，對(duì)一個(gè)育種單位而言，其所擁有的種質(zhì)資源，要適應(yīng)新的目標(biāo)生態(tài)區(qū)，即使在該區(qū)域建立育種基地，還需要一個(gè)漫長(zhǎng)的馴化和選育過(guò)程。

發(fā)明內(nèi)容

本發(fā)明的目的在于提供一種快速批量選育CMS恢復(fù)系的育種方法，旨在解決目前國(guó)內(nèi)種質(zhì)資源保護(hù)手段有限，出于單位自身利益考量，各育種單位之間種質(zhì)資源交流、合作育種等很難進(jìn)行，加上長(zhǎng)期的自然進(jìn)化和人工選擇，不同單位所擁有的種質(zhì)資源，大多僅適于本生態(tài)區(qū)，導(dǎo)致跨區(qū)域品種選育難度大、效率低，限制了我國(guó)油菜產(chǎn)業(yè)發(fā)展的問(wèn)題。

本發(fā)明是這樣實(shí)現(xiàn)的，一種甘藍(lán)型油菜細(xì)胞質(zhì)雄性不育系(CMS)恢復(fù)系的快速、批量選育方法,包括如下步驟：

1)以長(zhǎng)江上、中、下游和黃淮區(qū)國(guó)審的18個(gè)甘藍(lán)型油菜CMS三系雜交品種等量混合做為聚合親本；

2)當(dāng)年秋播，把聚合親本按1:2行比種植在隔離網(wǎng)室，行比1的做父本，行比2的做母本；

3)在蕾苔期，利用化學(xué)雜交劑“SX-1”誘導(dǎo)母本產(chǎn)生雄性不育；

4)在油菜花期，通過(guò)人工輔助授粉，使母本充分授粉結(jié)實(shí)，成熟時(shí)僅收取母本種子，做為下一個(gè)輪回的親本；

5)重復(fù)步驟2)到步驟4)，直至進(jìn)行4個(gè)世代的輪回；

6)把經(jīng)過(guò)4個(gè)世代輪回產(chǎn)生的聚合群體秋季播種，第2年花期，選用該群體正?？捎仓曛骰ㄐ蚝蜕喜糠种ι祥L(zhǎng)度3.5-4.0mm的花蕾，以0.5mmol/L的秋水仙堿加倍染色體48小時(shí)，通過(guò)小孢子培養(yǎng)獲得雙單倍體(DH)分離群體。

7)把該DH分離群體中正常可育的株系分別種植在4個(gè)不同生態(tài)區(qū)，依據(jù)各生態(tài)區(qū)的育種目標(biāo)進(jìn)行表現(xiàn)型選擇，同時(shí)和CMS不育系測(cè)交進(jìn)行基因型鑒定，最終選育出一批分別適應(yīng)長(zhǎng)江上、中、下游和黃淮區(qū)的優(yōu)良CMS恢復(fù)系。

進(jìn)一步,所選擇的聚合親本來(lái)自于4個(gè)不同生態(tài)區(qū)域，均為國(guó)內(nèi)多個(gè)育種單位選育的優(yōu)良國(guó)審品種，囊括了不同生態(tài)區(qū)域、不同育種單位的眾多優(yōu)良性狀基因。

進(jìn)一步,18個(gè)CMS三系雜交種等量混合構(gòu)成的聚合親本，其基因型為S(R,r)，經(jīng)過(guò)4個(gè)世代聚合重組產(chǎn)生新的聚合群體；花期取聚合群體正常植株的花蕾經(jīng)小孢子培養(yǎng)獲得的DH分離群體，不育株系直接淘汰；正常株系分別種植在4個(gè)生態(tài)區(qū)，依據(jù)各生態(tài)區(qū)育種目標(biāo)進(jìn)行表現(xiàn)型選擇符合育種目標(biāo)的優(yōu)良株系與CMS不育系進(jìn)行測(cè)交。。

進(jìn)一步,把獲得的DH分離群體分別放在4個(gè)不同生態(tài)區(qū)進(jìn)行表現(xiàn)型選擇，選育出的新的CMS恢復(fù)系，必然符合該生態(tài)區(qū)域的育種目標(biāo)。

進(jìn)一步,利用化學(xué)雜交劑“SX-1”誘導(dǎo)母本產(chǎn)生雄性不育，其技術(shù)要求如下：

1)在油菜蕾苔期，母本苔高20cm，主花序最大花蕾長(zhǎng)2mm左右時(shí)，利用化學(xué)雜交劑“SX-1”涂抹油菜莖干，誘導(dǎo)母本產(chǎn)生雄性不育。由于18個(gè)品種生育期進(jìn)程并不一致，所以在蕾苔期，對(duì)母本行滿(mǎn)足要求的植株逐個(gè)進(jìn)行涂莖處理。

2)涂莖誘導(dǎo)方法：吸取“SX-1”原液用食用油配成濃度為5.5-6.5mg/L的藥液，用毛筆涂抹在油菜莖干上，涂抹位置距離地面10cm左右，涂抹長(zhǎng)度5cm左右。