[發明專利]獨一味中Phlorigidoside C天然產物標準品制備方法及其應用

有效

• 申請號: 201611122116.8
• 申請日: 2016-12-08
• 公開（公告）號: CN106589009B
• 公開（公告）日: 2019-05-21
• 發明（設計）人: 岳會蘭;趙曉輝;于瑞濤;黨軍;邵赟;梅麗娟;王啟蘭;陶燕鐸
• 申請（專利權）人: 中國科學院西北高原生物研究所
• 主分類號: C07H1/08
• 分類號: C07H1/08;C07H17/04;A61K31/7048;A61P19/02;A61P29/00
• 代理公司: 蘭州中科華西專利代理有限公司 62002
• 代理人: 李艷華

1.獨一味中Phlorigidoside C天然產物標準品制備方法，包括以下步驟：

⑴樣品處理

獨一味全草切段后，經質量濃度為45%~75%的乙醇回流提取，即得獨一味提取物；

⑵溶劑萃取

將所述獨一味提取物先用質量體積比為1 kg：5~7 L的去離子水溶解，再依次用乙酸乙酯、正丁醇萃取4~6次，得到正丁醇萃取液；該正丁醇萃取液經減壓濃縮，即得正丁醇萃取物；

⑶大孔樹脂柱分離

將所述正丁醇萃取物用質量體積比為1 kg：5~7 L的去離子水溶解后，上D101大孔樹脂柱，用5~7倍柱床體積水溶液洗脫至有顏色后，得到含有Phlorigidoside C的洗脫液A，該洗脫液A經減壓濃縮得到Phlorigidoside C粗品；

⑷反相C₁₈柱分離

將所述Phlorigidoside C粗品用質量體積比為1 kg：3~5 L的去離子水溶解后，上C₁₈柱分離柱，用10倍柱床體積、質量濃度為10~20%的甲醇水溶液洗脫，得到含有PhlorigidosideC的洗脫液B，該洗脫液B經減壓濃縮得到初步純化的Phlorigidoside C；

⑸反相制備HPLC純化

將所述初步純化的Phlorigidoside C用水溶解后，經反相制備HPLC純化，收集最大色譜峰的洗脫液C，該洗脫液C經減壓濃縮，即得Phlorigidoside C天然產物標準品。

2.如權利要求1所述的獨一味中Phlorigidoside C天然產物標準品制備方法，其特征在于：所述步驟⑴中回流提取的條件是指料液比為1：5~10、溫度為60~80℃、提取次數為2~4次，每次1~3 h。

3.如權利要求1所述的獨一味中Phlorigidoside C天然產物標準品制備方法，其特征在于：所述步驟⑸中反相制備HPLC純化的條件是指反相制備柱XDB-C₁₈的孔徑為10 μm，尺寸為20×250 mm；柱溫為25℃；質量濃度為10~20%的甲醇水溶液洗脫；流速為0.8~1.0 ml/min。

4.如權利要求1所述的獨一味中Phlorigidoside C天然產物標準品制備方法，其特征在于：所述步驟⑵~⑸中減壓濃縮的條件是指溫度為60~70℃，真空度為0.6~0.8MPa。

5.如權利要求1所述的獨一味中Phlorigidoside C天然產物標準品制備方法所制得的Phlorigidoside C天然產物標準品在制備治療類風濕性關節炎藥物中的應用，其特征在于：該Phlorigidoside C天然產物標準品可作為有效成分按常規方法與藥學上可接受的任何載體制成各類藥用制劑。