[發明專利]一種模擬移動床色譜法提取甜葉菊中甜菊糖苷的方法

有效

• 申請號: 201611114921.6
• 申請日: 2016-12-07
• 公開（公告）號: CN106749448B
• 公開（公告）日: 2019-05-28
• 發明（設計）人: 王紹艷;魏伯峰;李守江;邊春陽;林懷朋
• 申請（專利權）人: 遼寧科技大學
• 主分類號: C07H15/256
• 分類號: C07H15/256;C07H1/08
• 代理公司: 鞍山貝爾專利代理有限公司 21223
• 代理人: 顏偉

1.一種模擬移動床色譜法提取甜葉菊中甜菊糖苷的方法，其特征在于包括如下步驟：

1）用水浸提甜葉菊，得到浸出液；

2）用柱層析法處理浸出液，得到甜菊糖苷的粗提液；

3）蒸餾濃縮粗提液，同時回收粗提液中的乙醇；

4）用模擬移動床色譜分離甜菊糖苷濃縮粗提液中的甜菊糖苷，SMB分離條件如下：

色譜柱：3～6根；

固定相：十八烷基硅烷鍵合硅膠ODS即C18，10～60 μm；

SMB工作模式：三帶SMB，包括洗脫帶、精制 帶和吸附帶；

進樣液：用上述的濃縮粗提液配制進樣液，進樣液中萊鮑迪苷A即RA濃度為5～35 mg/ml，乙醇的體積百分含量為40～60％；

流動相：洗脫帶的流動相P為乙醇與水的混合溶液或乙醇，流動相P中乙醇的體積百分含量為40～100％；精制帶和吸附帶的流動相D為乙醇與水的混合溶液，乙醇的體積百分含量為40～70％；流動相流速：在精制帶和吸附帶中，洗脫液D流速Q_D為每小時1～10倍柱體積，進樣液F流速Q_F為0.1Q_D～0.5Q_D，萃余液R流速Q_R=Q_D+Q_F；在洗脫帶中，洗脫液P流速Q_p為0.5Q_D～2Q_D，萃取液E流速Q_E＝Q_p；

模擬移動床操作溫度：室溫；

切換時間T_S：7～30min；

SMB分離過程如下：

在上述SMB工作條件下進行SMB分離，由原料液入口連續泵入進樣液，自動控制系統按切換時間T_S沿流動相方向將洗脫液入口、萃取液出口、原料液入口和萃余液出口的位置同時依次移動至下一根色譜柱，從萃余液R出口除去各種前雜質，從萃取液E出口得到甜菊糖苷萃取液；

5）分別將甜菊糖苷萃取液和雜質萃余液蒸餾濃縮，回收乙醇；再將濃縮的甜菊糖苷萃取液濃縮至干得到甜菊糖苷粗品；或者將濃縮的甜菊糖苷萃取液結晶，得到甜菊糖苷產品。

2.根據權利要求1所述的一種模擬移動床色譜法提取甜葉菊中甜菊糖苷的方法，其特征在于，所述的用水浸提甜葉菊的方法為，將甜葉菊原料粉碎，采用滲濾法提取，即在滲濾容器下設浸出液出口，容器內粉體高度7~30cm，加入甜葉菊重量5~10倍的水進行滲濾，水溫為0~60℃。

3.根據權利要求1或2所述的一種模擬移動床色譜法提取甜葉菊中甜菊糖苷的方法，其特征在于，所述的用柱層析法處理浸出液的方法為，層析柱固定相為AB-8，浸出液上樣量為0.2～1BV，依次用1～3BV的含0.5～1.8wt%NaOH的水溶液洗脫雜質、用2～3.5BV的水洗至中性、用1.5～2.5BV的乙醇洗脫甜菊糖苷的流出液，得到甜菊糖苷粗提液，粗提液中乙醇體積含量≥85%；所用流動相流速為0.5～1.5BV/h。

4.根據權利要求1所述的一種模擬移動床色譜法提取甜葉菊中甜菊糖苷的方法，其特征在于，所述的結晶方法為，以水-乙醇溶液或乙醇為結晶的介質，乙醇體積百分含量為85%～100%，結晶1～4次。

5.根據權利要求1所述的一種模擬移動床色譜法提取甜葉菊中甜菊糖苷的方法，其特征在于，所述的甜菊糖苷粗品，其中RA的HPLC純度高于67%，產率8.9～12%。