[發(fā)明專利]一種精氨酸利用能力提高的解淀粉芽孢桿菌及其應(yīng)用

有效

• 申請(qǐng)?zhí)枺?/td>: 201611112787.6
• 申請(qǐng)日: 2016-12-07
• 公開（公告）號(hào): CN106754491B
• 公開（公告）日: 2019-10-25
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 方芳;張夢(mèng)寒;李巧玉;陳堅(jiān);堵國成
• 申請(qǐng)（專利權(quán)）人: 江南大學(xué)
• 主分類號(hào): C12N1/20
• 分類號(hào): C12N1/20;A23L27/50;A23L33/135;A23L5/20;C12R1/07
• 代理公司: 哈爾濱市陽光惠遠(yuǎn)知識(shí)產(chǎn)權(quán)代理有限公司 23211
• 代理人: 彭素琴

本發(fā)明公開了一種精氨酸利用能力提高的解淀粉芽孢桿菌及其應(yīng)用，屬于食品微生物技術(shù)領(lǐng)域。本發(fā)明通過馴化得到一株高效利用精氨酸和瓜氨酸的解淀粉芽孢桿菌(Bacillus amyloliquefaciens)JY06?A8，該菌株能夠在高鹽條件下高效利用精氨酸和瓜氨酸，其對(duì)精氨酸的利用率達(dá)到了96％，不積累瓜氨酸，且傳代200代后精氨酸利用能力仍高于出發(fā)菌株，具備良好的傳代穩(wěn)定性。

技術(shù)領(lǐng)域

本發(fā)明涉及一種精氨酸利用能力提高的解淀粉芽孢桿菌及其應(yīng)用，屬于食品微生物技術(shù)領(lǐng)域。

背景技術(shù)

氨基甲酸乙酯(Ethyl carbamate,EC)是一種致癌物質(zhì)，被人體持續(xù)過量攝入可能會(huì)引發(fā)肺癌、肝癌等嚴(yán)重腫瘤疾病，并且對(duì)人體的免疫系統(tǒng)造成傷害。

醬油是食品工業(yè)廣泛使用的一種發(fā)酵調(diào)味品，是具有獨(dú)特色、香、味的營養(yǎng)豐富的功能性食品，在中國已有2500年的生產(chǎn)歷史。近年的研究結(jié)果表明，潛在的致癌物質(zhì)氨基甲酸乙酯(EC)，在醬油中尤其是日式工藝所生產(chǎn)的醬油中廣泛存在，這嚴(yán)重的影響了醬油的食品安全性。

釀造醬油中氨基甲酸乙酯的主要前體物質(zhì)是瓜氨酸與乙醇。因此降低醬油中瓜氨酸的含量是我們降低醬油中氨基甲酸乙酯有效措施之一。在醬油生產(chǎn)前期，原料水解出大量精氨酸，這些精氨酸在一大類厭氧或兼性厭氧的乳酸菌的作用下，被轉(zhuǎn)化為瓜氨酸。如果這些精氨酸被一些具有完整精氨酸脫亞氨基途徑的菌株利用，將精氨酸轉(zhuǎn)化成鳥氨酸，就能降低醬油中的瓜氨酸積累。因此，篩選一株能夠耐受高鹽，并且能夠高效利用精氨酸且不積累瓜氨酸的菌株，對(duì)于降低醬油中精氨酸含量，從而降低氨基甲酸乙酯的含量有重要應(yīng)用價(jià)值。

發(fā)明內(nèi)容

本發(fā)明的第一個(gè)目的是提供一種可高效利用精氨酸和瓜氨酸的解淀粉芽孢桿菌(Bacillus amyloliquefaciens)JY06-A8，已于2016年10月20日保藏于中國典型培養(yǎng)物保藏中心，保藏編號(hào)為CCTCC NO:M 2016580，保藏地址為中國武漢武漢大學(xué)。

本發(fā)明的第二個(gè)目的是提供所述解淀粉芽孢桿菌JY06-A8的培養(yǎng)方法，是將所述的解淀粉芽孢桿菌接種至培養(yǎng)基中，在37℃下培養(yǎng)24～48h。

在本發(fā)明的一種實(shí)施方式中，所述培養(yǎng)基為含NaCl的LB培養(yǎng)基，其中NaCl含量為80～180g/L。

在本發(fā)明的一種實(shí)施方式中，所述培養(yǎng)基含有酵母膏5g/L，牛肉膏5g/L，胰蛋白胨5g/L，NaCl 180g/L，葡萄糖0.5g/L，Tween-801g/L，MgSO₄·7H₂O 0.2g/L，MnSO₄·H₂O0.05g/L，F(xiàn)eSO₄0.4g/L，檸檬酸三胺2g/L，CaCO₃0.1g/L，吡哆醛-5-磷酸0.05g/L，K₂HPO₄2g/L，精氨酸5g/L，pH 6.0。

在本發(fā)明的一種實(shí)施方式中，所述解淀粉芽孢桿菌JY06-A8培養(yǎng)條件為：將保藏的誘變菌株在含100g/L NaCl的LB固體培養(yǎng)基上劃線，于37℃靜置培養(yǎng)2d，挑取單菌落接入含100g/LNaCl的LB液體培養(yǎng)基，37℃靜置培養(yǎng)36h，離心1min(8000rpm，4℃)后去上清，所獲得菌體的用磷酸鹽緩沖液(PBS，pH 7.0)重懸浮。

本發(fā)明的第三個(gè)目的是提供一種降低精氨酸含量的方法，是將所述的解淀粉芽孢桿菌JY06-A8接種至含精氨酸的液體、半固體或固體中，30～37℃培養(yǎng)至少24h。

本發(fā)明的第四個(gè)目的是提供所述解淀粉芽孢桿菌JY06-A8在降低食品中精氨酸含量方面的應(yīng)用。

本發(fā)明還提供所述解淀粉芽孢桿菌JY06-A8在制備發(fā)酵食品、調(diào)味品、保健品中的應(yīng)用。