[發(fā)明專利]一種馬來酸順反異構(gòu)酶的熱穩(wěn)定性改造及其應(yīng)用有效
| 申請?zhí)枺?/td> | 201611108889.0 | 申請日： | 2016-12-06 |
| 公開（公告）號： | CN106636052B | 公開（公告）日： | 2019-06-21 |
| 發(fā)明（設(shè)計）人： | 周哲敏;余龍;周麗;崔文璟;劉中美;郭軍玲;張斌 | 申請（專利權(quán)）人： | 江南大學(xué) |
| 主分類號： | C12N9/90 | 分類號： | C12N9/90;C12N15/61;C12N15/70;C12N1/21;C12P7/46;C12P13/20;C12R1/19 |
| 代理公司： | 哈爾濱市陽光惠遠知識產(chǎn)權(quán)代理有限公司 23211 | 代理人： | 彭素琴 |
| 地址： | 214122 江*** | 國省代碼： | 江蘇;32 |
| 權(quán)利要求書： | 查看更多 | 說明書： | 查看更多 |
| 摘要： | |||
| 搜索關(guān)鍵詞： | 野生型 順反異構(gòu) 馬來酸 突變體 熱穩(wěn)定性 半衰期 酶活 粘質(zhì)沙雷氏菌 改造 理性設(shè)計 酶工程 酶基因 熱穩(wěn)定 應(yīng)用 | ||
1.一種馬來酸順反異構(gòu)酶突變體，其特征在于，是將如SEQ ID NO.1所示的氨基酸序列中的第27位甘氨酸突變?yōu)楸彼岵⒌?71位甘氨酸突變?yōu)楸彼幔换蛘邔⒌?7位甘氨酸突變?yōu)楸彼岵⒌?04位賴氨酸突變?yōu)榫彼幔换蛘叩?7位甘氨酸突變?yōu)楸彼幔换蛘叩?04位賴氨酸突變?yōu)榫彼幔换蛘邔⒌?71位甘氨酸突變?yōu)楸彼帷?/p>
2.編碼權(quán)利要求1所述的馬來酸順反異構(gòu)酶突變體的基因。
3.攜帶權(quán)利要求2所述的基因的載體或細胞。
4.一種表達權(quán)利要求1所述的馬來酸順反異構(gòu)酶突變體的重組菌，其特征在于，將編碼突變體的基因與表達載體連接后，轉(zhuǎn)化宿主大腸桿菌。
5.根據(jù)權(quán)利要求4所述的一種表達權(quán)利要求1所述的馬來酸順反異構(gòu)酶突變體的重組菌，其特征在于，表達載體為pET-24a(+)、pET-28a、pRSFDuet-1或pETDuet-1。
6.根據(jù)權(quán)利要求4所述的一種表達權(quán)利要求1所述的馬來酸順反異構(gòu)酶突變體的重組菌，其特征在于，所述大腸桿菌是大腸桿菌BL21(DE3)。
7.權(quán)利要求1所述的馬來酸順反異構(gòu)酶突變體在生產(chǎn)富馬酸中的應(yīng)用。
8.權(quán)利要求1所述的馬來酸順反異構(gòu)酶突變體在生產(chǎn)天冬氨酸中的應(yīng)用。
9.權(quán)利要求1所述的馬來酸順反異構(gòu)酶突變體在生產(chǎn)蘋果酸中的應(yīng)用。
10.權(quán)利要求4或5所述的表達馬來酸順反異構(gòu)酶突變體的重組菌在生產(chǎn)富馬酸、天冬氨酸或蘋果酸中的應(yīng)用。
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