[發(fā)明專利]用于檢測COX-1、COX-2和GPIIIa基因多態(tài)性的核酸、試劑盒及方法

有效

• 申請?zhí)枺?/td>: 201611107856.4
• 申請日: 2016-12-06
• 公開（公告）號: CN106834434B
• 公開（公告）日: 2020-04-07
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 李存耀;史學(xué)暉;段衛(wèi)濤;趙平鋒
• 申請（專利權(quán)）人: 武漢海吉力生物科技有限公司
• 主分類號: C12Q1/6883
• 分類號: C12Q1/6883;C12N15/11
• 代理公司: 北京匯澤知識產(chǎn)權(quán)代理有限公司 11228
• 代理人: 程殿軍;張瑾

1.一組用于檢測COX-1、COX-2和GPIIIa基因多態(tài)性的核酸，其特征在于，該核酸包括以下的引物對和檢測探針：

COX-1基因A842G野生型引物對：核苷酸序列如SEQ ID NO.1和SEQ ID NO.3所示；

COX-1基因A842G突變型引物對：核苷酸序列如SEQ ID NO.2和SEQ ID NO.3所示；

COX-1基因A842G檢測探針：核苷酸序列如SEQ ID NO.4所示；

COX-2基因G-765C野生型引物對：核苷酸序列如SEQ ID NO.5和SEQ ID NO.7所示；

COX-2基因G-765C突變型引物對：核苷酸序列如SEQ ID NO.6和SEQ ID NO.7所示；

COX-2基因G-765C檢測探針：核苷酸序列如SEQ ID NO.8所示；

GPIIIa基因T1565C野生型引物對：核苷酸序列如SEQ ID NO.9和SEQ ID NO.11所示；

GPIIIa基因T1565C突變型引物對：核苷酸序列如SEQ ID NO.10和SEQ ID NO.11所示；

GPIIIa基因T1565C檢測探針：核苷酸序列如SEQ ID NO.12所示；

2.如權(quán)利要求1所述的核酸，其特征在于，所述核酸還包括內(nèi)部質(zhì)控，所述內(nèi)部質(zhì)控包括質(zhì)控引物對和質(zhì)控探針，所述質(zhì)控引物對的核苷酸序列如SEQ ID No.13和SEQ ID No.14所示，所述質(zhì)控探針的核苷酸序列如SEQ ID No.15所示。

3.如權(quán)利要求1或2所述的核酸，其特征在于，所述核酸還包括如下陽性對照物：

COX-1基因A842G野生型陽性對照物：含有如SEQ ID No.16所示的核苷酸序列；

COX-1基因A842G突變型陽性對照物：含有如SEQ ID No.17所示的核苷酸序列；

COX-2基因G-765C野生型陽性對照物：含有如SEQ ID No.18所示的核苷酸序列；

COX-2基因G-765C突變型陽性對照物：含有如SEQ ID No.19所示的核苷酸序列；

GPIIIa基因T1565C野生型陽性對照物：含有如SEQ ID No.20所示的核苷酸序列；

GPIIIa基因T1565C突變型陽性對照物：含有如SEQ ID No.21所示的核苷酸序列；

和/或質(zhì)控陽性對照物：含有如SEQ ID No.22所示的核苷酸序列。

4.一種用于檢測COX-1、COX-2和GPIIIa基因多態(tài)性的試劑盒，其特征在于，該試劑盒用于實(shí)時(shí)熒光PCR檢測COX-1基因A842G位點(diǎn)、COX-2基因G-765C位點(diǎn)和GPIIIa基因T1565C位點(diǎn)的野生型和突變型，所述試劑盒包括如權(quán)利要求1-3中任一所述的核酸，其中，各檢測探針的5＇端連接熒光基團(tuán)，3＇端連接淬滅基團(tuán)，或/和質(zhì)控探針的5＇端連接有不同于所述檢測探針的熒光基團(tuán)，3＇端連接有不同于所述檢測探針的淬滅基團(tuán)。

5.如權(quán)要求4所述的試劑盒，其特征在于，所述試劑盒還包括：PCR緩沖液、DNA聚合酶、dNTPs、礦物油、陰性對照物：水；所述熒光基團(tuán)為FAM、JOE、CY3、HEX中任意一種，所述淬滅基團(tuán)為MGB、BHQ1、TAMRA、BHQ2中任意一種。