[發明專利]一種五味子體細胞胚及其培養方法、培養基及應用

有效

• 申請號: 201611106501.3
• 申請日: 2016-12-05
• 公開（公告）號: CN106754629B
• 公開（公告）日: 2019-12-20
• 發明（設計）人: 孫丹;艾軍;秦洪艷;許培磊;趙瀅;劉迎雪;王振興;楊義明;范書田
• 申請（專利權）人: 中國農業科學院特產研究所
• 主分類號: C12N5/04
• 分類號: C12N5/04;C08H7/00
• 代理公司: 11371 北京超凡志成知識產權代理事務所(普通合伙)
• 代理人: 孫海杰

本發明公開了一種五味子體細胞胚及其培養方法、培養基及應用，屬于五味子組織培養技術領域。本發明通過對體細胞胚誘導培養基的碳源、通氣量和氮源的選擇和控制，在培養的過程中，使體細胞胚生長以及木質素合成的達到最佳狀態，培養得到的體細胞胚具有較高含量的木質素，本發明的五味子體細胞胚的培養方法以及由此方法得到的體細胞胚為五味子細胞培養生產次生代謝產物木質素的工廠化生產和產業化開發提供材料和依據。

技術領域

本發明涉及五味子組織培養技術領域，具體而言，涉及一種五味子體細胞胚及其培養方法、培養基及應用。

背景技術

五味子主產于吉林、遼寧、黑龍江、河北、山西、陜西、寧夏等北方各省的山區、半山區。五味子為常用中藥之一，始載于《神農本草經》，列為上品。五味子的有效成分是木質素成分,已從五味子科植物中分離出23個聯苯環辛二烯木質素類化合物,其中起主要作用的是五味子甲素、乙素、丙素、醇甲、醇乙、醋甲、醋乙、五味子酚，中醫認為它具有收斂固澀、益氣生津、被腎寧心的功能。近年醫藥學研究表明，五味子有抗疲勞、抗氧化、抗衰老、抗低溫等作用，對治療肝炎、急性腸道炎、神經衰弱、潛在克山病有一定療效。五味子(Schisandrachinensis(Turcz.)Baill.)的次生代謝產物木質素是工業生產中的主要原料之一，其具有廣泛的應用價值。但現有的通過直接利用五味子果實直接提取木質素的技術容易受季節以及生長周期的限制，不利于木質素工業化生產，另外現有的通過組織培養方法培養得到的用作提取木質素原料的五味子愈傷組織中的木質素含量較低，不能起到促進利用五味子愈傷組織培養物為原料提取木質素的工業化生產規模的作用。

發明內容

本發明的第一目的在于提供一種五味子體細胞胚的培養方法，此培養方法采用組織培養技術對五味子外植體培養得到含有木質素的體細胞胚，并且通過該培養方法得到體細胞胚含有的木質素量較高。

本發明的第二目的在于提供一種用于培養五味子體細胞胚的培養基，該培養基能夠誘導五味子胚性愈傷組織分化形成含有木質素的體細胞胚，且經該培養基培養得到體細胞胚中的木質素含量較高。

本發明的第三目的在于提供一種五味子體細胞胚，其由上述培養方法培養得到，其木質素含量較高，可用作提取木質素工業化生產中的原料。

本發明的第四目的在于提供五味子體細胞胚在制備木質素中的應用，以具有較高木質素含量的五味子體細胞胚用作提取木質素的原料，有利于實現木質素的大規模生產。

本發明解決其技術問題是采用以下技術方案來實現的。

一種五味子體細胞胚的培養方法，其包括：

取五味子外植體進行誘導培養，得到五味子胚性愈傷組織；

將所述五味子胚性愈傷組織接種至體細胞胚誘導培養基中，進行體細胞胚誘導培養，得到含木質素的體細胞胚；

其中，體細胞胚誘導培養基由每升1/2MS培養基中添加0.45-0.52mg BA、28-32g碳源以及0.4-0.6g氮源制成，體細胞胚誘導培養基pH為5.6-6.0，碳源是選自葡萄糖、果糖、蔗糖、乳糖以及山梨醇中的任意一種，氮源是選自椰汁、酵母提取物、水解酪蛋白以及水解乳蛋白中的任意一種。

一種用于培養五味子體細胞胚的培養基，其是由每升MS培養基中添加0.45-0.52mg BA、28-32g碳源以及0.4-0.6g氮源制成的體細胞胚誘導培養基，體細胞胚誘導培養基pH為5.6-6.0，碳源是選自葡萄糖、果糖、蔗糖、乳糖以及山梨醇中的任意一種，氮源是選自椰汁、酵母提取物、水解酪蛋白以及水解乳蛋白中的任意一種。

一種五味子體細胞胚，其上述五味子體細胞胚的培養方法培養所得到。

上述五味子體細胞胚在制備木質素中的應用。