[發(fā)明專利]關(guān)節(jié)止痛膏的標準特征圖譜的構(gòu)建及其質(zhì)量檢測方法

有效

• 申請?zhí)枺?/td>: 201611081071.4
• 申請日: 2016-11-30
• 公開（公告）號: CN106770850B
• 公開（公告）日: 2018-05-25
• 發(fā)明（設(shè)計）人: 劉道芳;劉海兵;柏金金;田湘玲;馬娜;程濟東
• 申請（專利權(quán)）人: 安徽安科余良卿藥業(yè)有限公司
• 主分類號: G01N30/34
• 分類號: G01N30/34;G01N30/02
• 代理公司: 合肥誠興知識產(chǎn)權(quán)代理有限公司 34109
• 代理人: 湯茂盛

1.一種關(guān)節(jié)止痛膏的標準特征圖譜的構(gòu)建方法，其步驟如下：

a)標樣溶液、參照物溶液的準備：將至少16批次合格的關(guān)節(jié)止痛膏分別加熱回流提取得到各標樣溶液，將二氫辣椒素對照品加甲醇制成參照物溶液；

b)高效液相色譜分析：精密吸取等量的各標樣溶液、參照物溶液，分別注入高效液相色譜儀進行測定，即得各標樣溶液和參照物溶液的色譜圖，高效液相色譜分析的色譜條件為：色譜柱以十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑，以甲醇為流動相A，以0.03～0.3％的磷酸溶液為流動相B，流動相按體積比為20～50：80～50的A相和B相梯度洗脫，流速0.5～1.5ml/min，檢測波長261±2nm，柱溫30～40℃，進樣液的進樣量為10～20μl，按照二氫辣椒素計算，理論塔板數(shù)≥8000；

c)標準特征圖譜的構(gòu)建：將得到的各標樣溶液的色譜圖導入中藥色譜指紋圖譜相似度評價系統(tǒng)，制定得到關(guān)節(jié)止痛膏的標準特征圖譜，該標準特征圖譜中有16個特征峰，按出現(xiàn)的時間順序?qū)⑺龅?6個特征峰依次編號1～12、S、13～15，以參照物溶液的色譜峰的相對保留時間為1，計算得知1～15號特征峰的平均相對保留時間分別為0.405、0.441、0.480、0.521、0.564、0.622、0.654、0.664、0.769、0.825、0.851、0.880、1.062、1.228、1.563；所述的S號色譜峰是二氫辣椒素的特征峰，其平均相對保留時間為1；

步驟b)中梯度洗脫的時間及流動相比例為：0～30min，A相20％→50％，B相80％→50％；35～50min，A相50％，B相50％；50～55min，A相50％→20％，B相50％→80％；55～60min，A相20％、B相80％。

2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的關(guān)節(jié)止痛膏的標準特征圖譜的構(gòu)建方法，其特征在于：步驟b)中所述的A相為色譜級甲醇。

3.根據(jù)權(quán)利要求2所述的關(guān)節(jié)止痛膏的標準特征圖譜的構(gòu)建方法，其特征在于：步驟a)中各標樣溶液的加熱回流提取步驟為：分別取合格的關(guān)節(jié)止痛膏2片，除去蓋襯，剪成小片，置250ml圓底燒瓶中，精密加入甲醇20ml，稱定重量，加熱回流15-30分鐘，放冷，稱重，用甲醇補足減失的重量，搖勻，濾過，取續(xù)濾液即為標樣溶液。

4.根據(jù)權(quán)利要求3所述的關(guān)節(jié)止痛膏的標準特征圖譜的構(gòu)建方法，其特征在于：步驟a)中參照物溶液的制備步驟為：取二氫辣椒素對照品，精密稱定，加甲醇制成每1ml含30-50μg對照品溶液，濾過，取續(xù)濾液即為參照物溶液。

5.一種如權(quán)利要求1-4中任一項所述關(guān)節(jié)止痛膏的標準特征圖譜的構(gòu)建方法在質(zhì)量檢測中的應(yīng)用，其步驟如下：按照標樣溶液和參照物溶液的方法制備并測定得到待測關(guān)節(jié)止痛膏的色譜圖和二氫辣椒素對照品的色譜圖，將待測關(guān)節(jié)止痛膏的色譜圖與構(gòu)建的標準特征圖譜比對，若待測關(guān)節(jié)止痛膏的色譜圖中出現(xiàn)標準特征圖譜中相同的16個特征峰，與參照物峰相應(yīng)的峰為S峰，計算各特征峰與S峰的相對保留時間，各特征峰的相對保留時間與標準特征圖譜中各特征峰的相對保留時間的相對標準偏差在±5％以內(nèi)，則該關(guān)節(jié)止痛膏的質(zhì)量合格，反之則不合格。