[發明專利]一種絨促性素精品的制造方法

在審

• 申請號: 201611077892.0
• 申請日: 2016-11-30
• 公開（公告）號: CN106632656A
• 公開（公告）日: 2017-05-10
• 發明（設計）人: 劉乃山;王林鵬
• 申請（專利權）人: 青島康原藥業有限公司
• 主分類號: C07K14/59
• 分類號: C07K14/59;C07K1/34;C07K1/14
• 代理公司: 暫無信息
• 代理人: 暫無信息

技術領域

本發明屬于生物制藥領域,具體地說是采用磷酸二氫鈉-磷酸氫二鈉緩沖液制造絨促性素精品的方法。

背景技術

絨促性素是從健康孕婦尿中提取、精制而成的一種天然促性腺激素，具有類似黃體生成素的功能。對女性可促進卵泡的成熟及排卵，并維持黃體的功能。對男性，能刺激睪丸間質細胞的發育，增加雄激素分泌，促使睪丸下降和男性第二性征發育。與尿促性素合用，可模擬生理性的促黃體生成素高峰，而觸發排卵。臨床上絨促性素至今仍是治療月經失調、無排卵性不孕癥、先兆流產和習慣性流產、隱睪癥、男性性功能低下等的首選藥物。

國際上從20年代就開始研究，1927年Zondek和Ascbheim首先發現妊娠婦女尿中存在著促性腺激素，1936年Brown和Venning找到在妊娠第60-80天，尿中絨促性素分泌達到最高峰。

1928年Zondek和Ascbheim 首先用乙醇沉淀法，從孕婦尿中取得了活性物質，其它研究者則進行應用吸附劑從尿中直接吸附絨促性素的研究，這包括1932年Katzman和Doisy用苯甲酸吸附法，1943年Katzman等人用人造沸石層析吸附法，1954年Loraine和Brown用高嶺土吸附法，1959年難波修一等人用離子交換樹脂吸附法等，用這些方法所取得的絨促性素再用各種純化方法進行純化。

發明內容

本發明公開了采用磷酸二氫鈉-磷酸氫二鈉緩沖液制造絨促性素精品的技術方法，它包括以下步驟：溶解、預過濾、超濾、納濾、凍干。

1、溶解：溫度8-12℃條件下，并且在此后的預過濾、超濾、納濾步驟維持這個溫度，用pH值7.0的0.1mol/L磷酸二氫鈉-磷酸氫二鈉緩沖液溶解絨促性素粗品，比例為每kg絨促性素粗品加入15-25L pH值7.0的 0.1mol/L磷酸二氫鈉-磷酸氫二鈉緩沖液，攪拌20-40分鐘，得到絨促性素料液。

2、預過濾：將絨促性素料液用0.22μm濾芯預過濾，壓力不超過0.2MPa，得到絨促性素過濾液。

3、超濾：將絨促性素過濾液用10KD超濾膜進行超濾濃縮，壓力不超過0.1MPa，濃縮體積至原體積的15%-20%，得到絨促性素超濾液。

4、納濾：將絨促性素超濾液用20nm的濾芯進行納濾，壓力不超過0.3MPa，得到絨促性素納濾液。

5、凍干：將絨促性素納濾液放入真空冷凍干燥機速凍至溫度為-50℃，開始抽真空至真空度為-0.1MPa，繼續維持制冷2-3小時，然后將制冷變為加熱，緩慢加熱使納濾液溫度上升至30-35℃時即得絨促性素精品。

所述制得的絨促性素精品：收率≥80%，效價≥6000IU/mg，25℃溫度條件下存放6個月效價降低≤5%。

與現有技術相比，本發明的優點和積極效果是：

采用磷酸二氫鈉-磷酸氫二鈉緩沖液制造絨促性素精品, 制造過程在低溫條件下進行，能有效減少長期高溫條件對絨促性素活性的影響；通過一系列過濾方式，顯著降低雜質含量；制造的絨促性素精品，收率≥80%，效價≥6000IU/mg，25℃溫度條件下存放6個月效價降低≤5%，外觀、理化、微生物限度等指標均達到或超過國內外相關藥品標準；方法工藝簡單，生產成本低，產量高，可工業化生產。

具體實施方式

下面結合具體實施例對本發明做進一步說明。

實施例1

（1）溫度8℃條件下，并且在此后的預過濾、超濾、納濾步驟維持這個溫度，1kg絨促性素粗品加入18L pH值7.0的0.1mol/L磷酸二氫鈉-磷酸氫二鈉緩沖液，攪拌20分鐘，得到絨促性素料液。

（2）將絨促性素料液用0.22μm濾芯預過濾，壓力不超過0.2MPa，得到絨促性素過濾液。

（3）將絨促性素過濾液用10KD超濾膜進行超濾濃縮，壓力不超過0.1MPa，濃縮體積至原體積的15%，得到絨促性素超濾液。

（4）將絨促性素超濾液用20nm的濾芯進行納濾，壓力不超過0.3MPa，得到絨促性素納濾液。

（5）將絨促性素納濾液放入真空冷凍干燥機速凍至溫度為-50℃，開始抽真空至真空度為-0.1MPa，繼續維持制冷2小時，然后將制冷變為加熱，緩慢加熱使納濾液溫度上升至30℃時即得絨促性素精品。

檢測制得的絨促性素精品：收率86%，效價6470IU/mg，25℃溫度條件下存放6個月效價降低2%。

實施例2