[發明專利]一種富含生長因子的殼聚糖可溶性紗布的制備方法

在審

• 申請號: 201611072659.3
• 申請日: 2016-11-28
• 公開（公告）號: CN106729955A
• 公開（公告）日: 2017-05-31
• 發明（設計）人: 單桂秋;林放;施琳穎;周謀
• 申請（專利權）人: 廣州軍區廣州總醫院
• 主分類號: A61L26/00
• 分類號: A61L26/00
• 代理公司: 佛山幫專知識產權代理事務所(普通合伙)44387
• 代理人: 胡麗琴

1.一種富含生長因子的殼聚糖可溶性紗布的制備方法，其特征在于，所述方法包括如下步驟：

S1、按照重量比例稱取輔料配置血小板預處理液；

S2、制備血小板凍干緩沖液；

S3、制備預處理的富血小板血漿；

S4、配置羧甲基殼聚糖溶液；

S5、制備富含生長因子的殼聚糖可溶性紗布。

2.根據權利要求1所述的一種富含生長因子的殼聚糖可溶性紗布的制備方法，其特征在于，所述的輔料由包含以下重量份的原料組成：3.214gNaCl、0.157gKCl、0.078gCaCl₂、0.271gMgSO₄、2.604gNaHCO₃、0.714g檸檬酸、1.970g檸檬酸鈉、1.230g乙酸鈉、2.120g葡萄糖、17.117g海藻糖。

3.根據權利要求1所述的一種富含生長因子的殼聚糖可溶性紗布的制備方法，其特征在于，S1中所述血小板預處理液的配置方法包括：將3.214gNaCl、0.157gKCl、0.078gCaCl₂、0.271gMgSO₄、2.604gNaHCO₃、0.714g檸檬酸、1.970g檸檬酸鈉、1.230g乙酸鈉、2.120g葡萄糖、17.117g海藻糖均勻混合后，用超純水溶解并定容至1L，按1ml所述血小板預處理液加入1ul可逆性血小板激活抑制劑的比例加入可逆性血小板激活抑制劑前列腺素E1，然后加入NaHCO₃來調節pH為6.6～6.8，然后用0.22um濾器過濾后備用。

4.根據權利要求1所述的一種富含生長因子的殼聚糖可溶性紗布的制備方法，其特征在于，S2中所述血小板凍干緩沖液的制備方法包括：在S1中所述血小板預處理液中加入體積分數為30％(vol/vol)的蛋白質類保護劑調節pH為6.6～6.8，然后用0.22um濾器過濾后備用。

5.根據權利要求4所述的一種富含生長因子的殼聚糖可溶性紗布的制備方法，其特征在于，所述的蛋白質類保護劑選自血漿。

6.根據權利要求1所述的一種富含生長因子的殼聚糖可溶性紗布的制備方法，其特征在于，S3中所述預處理的富血小板血漿的制備方法包括：匯集6-8人份的血小板，通過離心處理并移去上層清液得沉淀A，然后用S1中所述血小板預處理液重懸所述沉淀A，調整所述沉淀A中的血小板計數，在37℃水浴震蕩4h，使血小板保持懸浮狀態，將上述血小板懸液離心處理并移去上層清液得沉淀B；然后將S2中所述血小板凍干緩沖液離心處理并移去上層清液得沉淀C，將所述沉淀B和沉淀C按照等體積混合重懸血小板，即得預處理的富血小板血漿。

7.根據權利要求1所述的一種富含生長因子的殼聚糖可溶性紗布的制備方法，其特征在于，S4中所述羧甲基殼聚糖溶液的配置方法包括：將4g羧甲基殼聚糖用200ml滅菌水徹底溶解，持續攪拌12h，使其徹底溶解，然后用0.45um濾器過濾除菌，終濃度為2％(wt/vol)，并調整pH至7～8。

8.根據權利要求1所述的一種富含生長因子的殼聚糖可溶性紗布的制備方法，其特征在于，S5中所述富含生長因子的殼聚糖可溶性紗布的制備方法包括：將S3中所述預處理的富血小板血漿與S4中所述羧甲基殼聚糖按體積比為1：2攪拌混合均勻后加入培養皿中，厚度為4mm，密封保存在-80℃冰箱預凍過夜后，轉移至冷凍干燥機凍干24h，然后裁剪成不同大小紗布，加入血小板激活劑溶液即可形成富含生長因子的殼聚糖可溶性紗布。

9.根據權利要求8所述的一種富含生長因子的殼聚糖可溶性紗布的制備方法，其特征在于，所述的血小板激活劑溶液為用5ml葡萄糖酸鈣溶解500U凝血酶所配制的溶液。