[發(fā)明專利]一種豬繁殖與呼吸綜合征活疫苗用稀釋液

在審

• 申請(qǐng)?zhí)枺?/td>: 201611071407.9
• 申請(qǐng)日: 2016-11-29
• 公開（公告）號(hào): CN106620689A
• 公開（公告）日: 2017-05-10
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 沈建軍;張秀文;李陽
• 申請(qǐng)（專利權(quán)）人: 浙江美保龍生物技術(shù)有限公司
• 主分類號(hào): A61K39/39
• 分類號(hào): A61K39/39;A61K39/12;A61K47/36;A61K47/18;A61P31/14
• 代理公司: 杭州浙科專利事務(wù)所(普通合伙)33213
• 代理人: 沈淵琪

1.一種豬繁殖與呼吸綜合征活疫苗用稀釋液，其特征在于每1000ml pH=7的磷酸鹽緩沖液中包含：桑葉多糖1-8g、云芝多糖0.1-5g、地黃多糖1-5g和胸腺五肽0.1-5g。

2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種豬繁殖與呼吸綜合征活疫苗用稀釋液，其特征在于每1000ml pH=7的磷酸鹽緩沖液中包含：桑葉多糖2-6g、云芝多糖0.5-2g、地黃多糖1-3g和胸腺五肽0.5-1g。

3.根據(jù)權(quán)利要求1或2所述的一種豬繁殖與呼吸綜合征活疫苗用稀釋液，其特征在于所述桑葉多糖的制備包括以下步驟：

（1）將桑葉粉碎后過70-100目篩，得桑葉粉末，置于干燥環(huán)境中貯存?zhèn)溆茫?/p>

（2）將步驟（1）中所得桑葉粉末按料液比1:20-50g/ml加入75-85℃水中浸提100-120min，每間隔20-30min攪拌一次；

（3）對(duì)步驟（2）中浸提完畢的料液進(jìn)行過濾，收集濾液；對(duì)所得濾液進(jìn)行減壓濃縮得濃縮液，減壓濃縮條件為：溫度50-60℃，轉(zhuǎn)速50r/min，真空度600-700mmHg；

（4）向步驟（3）中所得濃縮液中加入無水乙醇，于4℃冰箱中醇沉20-24h后，以5000-6000 r/min的轉(zhuǎn)速離心15-20min，收集不溶物；

（5）利用無水乙醚對(duì)步驟（4）中所得不溶物浸洗5-8次，再加入蒸餾水，離心，收集澄清液；

（6）對(duì)步驟（5）中所得澄清液進(jìn)行真空冷凍干燥，得桑葉多糖。

4.根據(jù)權(quán)利要求1或2所述的一種豬繁殖與呼吸綜合征活疫苗用稀釋液，其特征在于所述云芝多糖的制備包括以下步驟：

a. 將干燥的云芝碎片置于90-100℃水中煮提9-10h，過濾，收集濾液；

b．將步驟a中所得濾液濃縮至原體積的1/2，再加入3-4倍體積的95%乙醇，置于25-27℃環(huán)境中靜置沉淀20-24h，得沉淀液；

c．將步驟b中所得沉淀液3000-4000r/min的轉(zhuǎn)速離心15-20min，將所得沉淀物置于常溫下干燥，即得云芝多糖。

5.根據(jù)權(quán)利要求1或2所述的一種豬繁殖與呼吸綜合征活疫苗用稀釋液，其特征在于所述地黃多糖的制備包括以下步驟：

A．稱取地黃，按液固比30-40：1加入蒸餾水，加熱至90-110℃，浸提2-3h，過濾，收集濾液；

B．將步驟A中所得濾液濃縮至原體積的1/3-1/2，用sevag試劑法除去蛋白，上清液加氯仿離心，水層加80%-90%乙醇沉淀，沉淀物分別用丙酮和乙醇洗滌2 次，真空干燥得地黃多糖。

6.根據(jù)權(quán)利要求1或2所述的一種豬繁殖與呼吸綜合征活疫苗用稀釋液，其特征在于所述pH=7的磷酸鹽緩沖液的制備方法如下：

d．稱取下列原料組分：氯化鈉6-10g、氯化鉀0.05-0.5g、磷酸氫二鈉1-1.2g、磷酸二氫鉀0.05-0.5g、氯化鈣0.05-0.2g和六水氯化鎂0.05-0.2g，混合均勻備用；

e．向步驟d中所得原料組分的混合物中加入1000mL的雙蒸水，充分溶解后，在116℃條件下高壓滅菌30min，即得pH=7的磷酸鹽緩沖液。