[發明專利]小酸漿的分子特異性標記引物和檢測方法有效
| 申請號： | 201611071090.9 | 申請日： | 2016-11-29 |
| 公開（公告）號： | CN106636369B | 公開（公告）日： | 2020-05-19 |
| 發明（設計）人： | 馮尚國;王慧中;焦凱麗;姜夢瑩;盧江杰;沈晨佳 | 申請（專利權）人： | 杭州師范大學 |
| 主分類號： | C12Q1/6895 | 分類號： | C12Q1/6895;C12N15/11 |
| 代理公司： | 杭州君度專利代理事務所(特殊普通合伙) 33240 | 代理人： | 杜軍 |
| 地址： | 310036 浙江省*** | 國省代碼： | 浙江;33 |
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| 摘要： | |||
| 搜索關鍵詞： | 小酸漿 分子 特異性 標記 引物 檢測 方法 | ||
1.小酸漿的分子特異性標記引物，其特征在于該特異性標記引物序列如下：
上游引物XSJF: 5’- TTGCAAACTATCTTGTGAGTCG-3’；
下游引物XSJR: 5’- CCACCAGAATGTACTTGTTACG-3’。
2.一種利用權利要求1所述的分子特異性標記引物對小酸漿進行快速檢測的方法，其特征在于所述方法為：以所述分子特異性標記引物作為擴增引物，以待測酸漿屬植物樣品基因組DNA為模板，進行PCR擴增，電泳檢測，若電泳結果出現444 bp大小的特異性片段，則待測樣品為小酸漿，反之則不是；
所述分子特異性標記引物序列為：
上游引物XSJF: 5’- TTGCAAACTATCTTGTGAGTCG-3’；
下游引物XSJR: 5’- CCACCAGAATGTACTTGTTACG-3’。
3.如權利要求2所述的方法，其特征在于所述的PCR擴增體系包括含Mg2+ 10×Buffer 2μL，10mM dNTPs 0.8μL，10μM引物XSJF 1μL，10μM引物XSJR 1μL，2U/μL Taq酶 0.5μL，50ng/μL模板DNA 1μL，ddH2O 13.7μL，共計20μL。
4.如權利要求2所述的方法，其特征在于所述的PCR反應程序設置為： 94℃預變性5min；94℃變性50 s，60℃退火50 s，72℃延伸1.5 min, 共35個循環；72℃延伸10 min。
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