[發明專利]一種構建哮喘免疫耐受模型的方法在審
| 申請號: | 201611064253.0 | 申請日: | 2016-11-28 |
| 公開(公告)號: | CN108114272A | 公開(公告)日: | 2018-06-05 |
| 發明(設計)人: | 施天昀;何燕超;孫偉;揭志軍 | 申請(專利權)人: | 上海市第五人民醫院 |
| 主分類號: | A61K38/38 | 分類號: | A61K38/38;A01K67/02 |
| 代理公司: | 暫無信息 | 代理人: | 暫無信息 |
| 地址: | 200240 *** | 國省代碼: | 上海;31 |
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| 摘要: | |||
| 搜索關鍵詞: | 構建 免疫耐受 質量分數 哮喘 小鼠 免疫耐受小鼠 霧化 動物模型構建 飲用無菌水 腹腔注射 霧化激發 致敏小鼠 無菌水 母乳 耐受 飲用水 飲用 | ||
1.一種構建哮喘免疫耐受模型的方法,其特征在于,包括以下步驟,
A.建立免疫耐受小鼠模型:讓幼鼠每日飲用含質量分數為0.5-1.5%OVA的無菌水,連續7日,每24h更換飲用水,第八日開始飲用無菌水;第15日予以腹腔注射125ul含質量分數為0.5-1.5%OVA致敏小鼠,第22日開始予以含質量分數為0.5-1.5%的OVA霧化激發小鼠1個小時,連續7日;
B.免疫耐受小鼠模型的鑒定。
2.根據權利要求1所述的構建哮喘免疫耐受模型的方法,其特征在于:步驟A中,幼鼠為3-4周齡的小鼠。
3.根據權利要求1所述的構建哮喘免疫耐受模型的方法,其特征在于:步驟A中,幼鼠為3-4周齡的SPF級BALB/c雌性小鼠。
4.根據權利要求1所述的構建哮喘免疫耐受模型的方法,其特征在于:步驟A中,小鼠每日飲用含質量分數為1%OVA的無菌水。
5.根據權利要求1所述的構建哮喘免疫耐受模型的方法,其特征在于:步驟A中,第15日予以腹腔注射125ul含質量分數為1%OVA致敏小鼠。
6.根據權利要求1所述的構建哮喘免疫耐受模型的方法,其特征在于:步驟A中,第22日開始予以含質量分數為1%的OVA霧化激發小鼠1個小時。
7.根據權利要求1所述的構建哮喘免疫耐受模型的方法,其特征在于:步驟B中,免疫耐受小鼠模型的鑒定包括測定OVA特異性IgE含量。
8.根據權利要求1所述的構建哮喘免疫耐受模型的方法,其特征在于:步驟B中,免疫耐受小鼠模型的鑒定包括,
a.進行支氣管肺泡灌洗、進行細胞計數和分類、測定氣管肺泡灌洗液中IL-4、IL-5、IL-13和IFN-γ細胞因子的含量;
b.右肺組織勻漿抽提RNA,用時實定量PCR測定步驟a中細胞因子的mRNA的表達。
9.根據權利要求1所述的構建哮喘免疫耐受模型的方法,其特征在于:步驟B中,左肺組織進行蘇木素-伊紅、高碘酸-席夫氏病理染色。
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