[發(fā)明專利]從發(fā)酵茶中拆分泰德諾A和泰德諾B的方法

有效

• 申請?zhí)枺?/td>: 201611061352.3
• 申請日: 2016-11-28
• 公開（公告）號: CN108117558B
• 公開（公告）日: 2020-10-30
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 劉佳金;丁章貴;高林瑞;陳丹丹;劉敏;唐蜀昆
• 申請（專利權(quán)）人: 勐海茶業(yè)有限責(zé)任公司;云南大益微生物技術(shù)有限公司
• 主分類號: C07D493/04
• 分類號: C07D493/04;C07B57/00;A23F3/10
• 代理公司: 北京天昊聯(lián)合知識產(chǎn)權(quán)代理有限公司 11112
• 代理人: 王靜;丁業(yè)平

1.一種從發(fā)酵茶中拆分泰德諾A和泰德諾B的方法，所述泰德諾A的結(jié)構(gòu)式如下式(I)所示，泰德諾B的結(jié)構(gòu)式如下式(II)所示：

其中所述方法包括以下步驟：

A)提供含有泰德諾A和泰德諾B的發(fā)酵茶；

B)將所述發(fā)酵茶進(jìn)行開水浸提，以得到浸提液；

C)用有機(jī)溶劑對所述浸提液進(jìn)行萃取，以得到含有泰德諾A和泰德諾B的提取物；

D)對所述提取物進(jìn)行硅膠柱分離，以得到粗分離物；和

E)對所述粗分離物進(jìn)行大孔樹脂柱分離，其中采用5％體積至小于20％體積的乙醇或甲醇水溶液進(jìn)行洗脫，收集洗脫液，從而得到泰德諾A；

其中所述方法還包括F)利用20％體積至60％體積的乙醇或甲醇水溶液對經(jīng)過步驟E)處理的大孔樹脂柱進(jìn)行洗脫，收集洗脫液，從而得到泰德諾B；

其中步驟C)包括：

C1)用1,2-二氯乙烷或氯仿對所述浸提液進(jìn)行萃取，以得到水相和有機(jī)相；其中所述1,2-二氯乙烷或氯仿與所述浸提液的體積比為1:(1-3)；和

C2)用乙酸乙酯對步驟C1)得到的水相進(jìn)行萃取，以得到所述含有泰德諾A和泰德諾B的提取物；其中所述乙酸乙酯與所述水相的體積比為1:(1-3)。

2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的方法，其中在步驟D)中，采用體積比為(10-30):1的氯仿:甲醇洗脫液進(jìn)行洗脫，以得到所述粗分離物。

3.根據(jù)權(quán)利要求1所述的方法，其中在步驟B)中，所述開水浸提在30000-50000HZ的超聲波下進(jìn)行2-4次，每次10-50分鐘。

4.根據(jù)權(quán)利要求1所述的方法，其中在步驟B)中，按所述發(fā)酵茶與開水的質(zhì)量比為1:(1-3)的比例混合所述發(fā)酵茶和開水，以進(jìn)行所述開水浸提；其中所述開水的溫度為80℃至100℃。

5.根據(jù)權(quán)利要求1所述的方法，其中所述方法還包括G)對經(jīng)所述大孔樹脂柱分離得到的泰德諾A進(jìn)行高效液相色譜(HPLC)純化，其中所述HPLC采用C-18柱，流動相為甲醇與水的體積比為11:9至3:7的甲醇/水混合溶液。

6.根據(jù)權(quán)利要求1所述的方法，所述方法還包括H)對經(jīng)所述大孔樹脂柱分離得到的泰德諾B進(jìn)行HPLC純化，其中所述HPLC采用C-18柱，流動相為甲醇與水的體積比為1:1至3:7的甲醇/水混合溶液。

7.根據(jù)權(quán)利要求1所述的方法，其中步驟A)包括將毛茶潮水至含水量為基于毛茶干重計(jì)為大于40重量％至65重量％，將所得經(jīng)潮水的毛茶滅菌，然后接種黑曲霉單一菌種，經(jīng)發(fā)酵培養(yǎng)后得到含有泰德諾A和泰德諾B的發(fā)酵茶。

8.根據(jù)權(quán)利要求2所述的方法，其中在步驟D)中，所述硅膠柱為200-300目的硅膠柱。

9.根據(jù)權(quán)利要求7所述的方法，其中所述發(fā)酵培養(yǎng)在28-40℃下進(jìn)行10-25天。

10.根據(jù)權(quán)利要求7所述的方法，其中所述毛茶選自曬青毛茶、毛綠茶、毛白茶、毛黃茶和毛青茶。