[發明專利]一種抗HIV/AIDS的基因打靶載體及構建方法和應用

在審

• 申請號: 201611055288.8
• 申請日: 2016-11-25
• 公開（公告）號: CN108103095A
• 公開（公告）日: 2018-06-01
• 發明（設計）人: 朱煥章;季海燕
• 申請（專利權）人: 復旦大學
• 主分類號: C12N15/85
• 分類號: C12N15/85;C12N5/10;C12N15/65
• 代理公司: 上海元一成知識產權代理事務所(普通合伙) 31268
• 代理人: 吳桂琴

本發明屬于生物工程領域，具體涉及構建并獲得將具有靶向切除HIV?1前病毒基因的調控型ZFN表達元件定點插入HIV?1感染輔助受體CCR5位點的打靶載體；經該載體修飾的人造血干細胞或免疫細胞,不僅由于CCR5分子的敲除可阻斷CCR5嗜性毒株的感染，而且,也可對CXCR4嗜性毒株或漏入的病毒、潛伏感染在宿主靶細胞染色體中的前病毒基因進行切除，具有更徹底及廣泛的抗HIV感染活性。

技術領域

本發明屬于生物工程領域，涉及一種新的抗HIV/AIDS的基因打靶載體及構建方法，具體涉及在CCR5位點定向插入抗艾滋病病毒元件的打靶載體及構建，尤其涉及用于靶向敲除HIV-1病毒感染輔助受體CCR5并在該位點定向插入抗病毒元件的打靶載體及其制備方法。

背景技術

現有技術公開了艾滋病(Acquired immunodeficiency syndrome，AIDS)主要是由人類免疫缺陷病毒I型(Human immunodeficiency virus 1，HIV-1)感染而導致的一種傳染性疾病。實踐顯示，盡管，高效抗逆轉錄病毒治療(Highly active antiretroviraltherapy，HAART)可以抑制病毒復制、延長病人壽命，但在使用過程中尚存在一定的不足：如昂貴的藥物費用、長期服用藥物伴有的副作用、病毒的耐藥性及當前抗病毒藥物不能根除病毒等一系列問題。截至目前，國際上艾滋病疫苗研究已有二十余載，雖然耗巨資進行了此類疫苗的100多次臨床試驗，但目前尚無有效疫苗問世，兩項已完成Ⅲ期的臨床試驗均以失敗告終，所以尋找治愈艾滋病的制品的任務更加繁重。

2007年，“柏林病人”接受骨髓干細胞移植治療后，艾滋病病毒從體內消失的奇跡給予人們新的希望。研究者揭示，病人成功治愈的原因不僅僅在于骨髓供體者的配型非常吻合，而且捐贈的骨髓中還有一種能天然抵御艾滋病病毒的變異基因CCR5。據統計，這種變異基因僅在少數西歐人群中存在，因此，尋找配型吻合且CCR5基因天然變異的供體實屬困難。不過，“柏林”病人成功治愈的實例提示，以病毒感染輔助受體CCR5分子為靶點，可阻斷病毒的感染，這將艾滋病的治療方向引入到了基因治療領域。