[發(fā)明專利]一種鱈魚排鮮味肽及其制備方法

有效

• 申請?zhí)枺?/td>: 201611050074.1
• 申請日: 2016-11-24
• 公開（公告）號: CN106720926B
• 公開（公告）日: 2019-07-02
• 發(fā)明（設(shè)計）人: 侯虎;王石開;李八方
• 申請（專利權(quán)）人: 中國海洋大學(xué)
• 主分類號: A23J3/34
• 分類號: A23J3/34;A23L27/24
• 代理公司: 北京志霖恒遠(yuǎn)知識產(chǎn)權(quán)代理事務(wù)所(普通合伙) 11435
• 代理人: 朱昀

1.一種鱈魚排鮮味肽的制備方法，其特征在于由以下步驟組成：

(1)鱈魚排的預(yù)處理：將鱈魚排流水清洗，清水洗凈剪成小塊后以w/v1:2的比例浸泡于CaCl₂溶液中，超聲波輔助清洗2-3次，每次清洗3-5min，間隔10min，水洗2-3次；

(2)鱈魚排水解液的制備：將預(yù)處理后的鱈魚排置于高壓滅菌鍋中處理，冷卻后按照料液比w/v1:3-1:5先進(jìn)行勻漿，然后用膠體磨均質(zhì)，粉碎粒徑至5-20μm；調(diào)節(jié)pH至7.5-8.0加入總量占鱈魚排質(zhì)量0.6-0.8％的胰蛋白酶和木瓜蛋白酶，胰蛋白酶和木瓜蛋白酶比例為1:1，50-55℃酶解2-2.5h；然后調(diào)節(jié)pH至7.0-7.5加入鱈魚排質(zhì)量0.6-0.8％的風(fēng)味蛋白酶，50-55℃酶解1.5-2h；再在95-100℃滅酶，離心分離上清液即為鱈魚排酶解液；

在上述酶解液中接種鱈魚排質(zhì)量0.3-0.5％的米曲霉與鱈魚排質(zhì)量0.3-0.5％的魯氏接合酵母的復(fù)合菌株，在28-35℃的溫度下發(fā)酵120-180min；

(3)純化：超濾獲得小于1000Da的肽組分，將超濾液采用SP Sephadex C25陽離子交換柱純化，洗脫液梯度：A液為0-1M NaCl溶液，用B液配制；B液為1M醋酸或醋酸鈉緩沖液，控制流速0.4Bv/h，上樣濃度4mg/mL，收集峰脊；

(4)制備鱈魚排鮮味肽：在錐形瓶中加入2.5g預(yù)先處理的大孔吸附樹脂，用無水乙醇充分溶脹，用去離子水洗凈無水乙醇，再加入質(zhì)量濃度為10mg/mL的鱈魚排酶解發(fā)酵液150mL，將錐形瓶放入25℃恒溫?fù)u床中振蕩12h；選擇水與30％、50％、70％的乙醇和無水乙醇作為洗脫劑，對已吸附鱈魚排酶解發(fā)酵液并達(dá)到飽和的樹脂解吸24h，洗脫；

將上述樹脂脫鹽后的液體用噴霧干燥機(jī)噴干成粉。

2.如權(quán)利要求1所述的鱈魚排鮮味肽的制備方法，其特征在于：所述步驟(1)所用的CaCl₂溶液濃度為0.1-0.2％；超聲波輔助清洗的功率為150W，頻率為40KHz。

3.如權(quán)利要求1所述的鱈魚排鮮味肽的制備方法，其特征在于：所述步驟(2)中高壓滅菌條件為121℃、0.1Mpa下處理35-55min；第一次離心分離條件為4000-4200r/min，15-20min；第二次離心分離條件為4000-4200r/min，30-35min。

4.如權(quán)利要求1所述的鱈魚排鮮味肽的制備方法，其特征在于：所述步驟(2)中第一次離心分離后上清液即為鱈魚排酶解液，水解度為26.5％-29.6％。

5.如權(quán)利要求1所述的鱈魚排鮮味肽的制備方法，其特征在于：所述步驟(2)中米曲霉菌種為AS3.951，魯氏接合酵母菌種為NCYC381。

6.如權(quán)利要求1所述的鱈魚排鮮味肽的制備方法，其特征在于：所述步驟(4)中恒溫振蕩速度為160次/min，干燥條件為進(jìn)風(fēng)溫度為170-190℃，出風(fēng)溫度為85-95℃。

7.一種鱈魚排鮮味肽，其特征在于：由權(quán)利要求1-6任一項的方法制得，鱈魚排鮮味肽分子量小于1000Da的占85-90％以上，其中肽類氨基酸的比例和游離氨基酸的比例各占50％，鮮味的氨基酸和肽含量占氨基酸總量75-85％以上；鮮味值高于谷氨酸鈉3.0-4.0倍，

具有重復(fù)序列的三條特征鮮味肽：

Gly-Ala-Asp-Gly-Asn-Val-Gly-Pro-Ala；

Gly-Ala-Pro-Gly-Pro-Val-Gly-Pro-Ala-Gly-Lys；

Thr-Gly-Pro-Lys-Gly-Pro-Thr--Gly-Pro-Arg。