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[發(fā)明專利]一種脫細(xì)胞角膜緣保護(hù)液及脫細(xì)胞角膜緣的制備方法有效

專利信息
申請(qǐng)?zhí)枺?/td> 201611044689.3 申請(qǐng)日: 2016-11-24
公開(公告)號(hào): CN106614519B 公開(公告)日: 2019-11-19
發(fā)明(設(shè)計(jì))人: 史偉云;周慶軍;董沐晨 申請(qǐng)(專利權(quán))人: 山東省眼科研究所
主分類號(hào): A01N1/00 分類號(hào): A01N1/00;A61L27/36
代理公司: 11569 北京高沃律師事務(wù)所 代理人: 王加貴<國(guó)際申請(qǐng)>=<國(guó)際公布>=<進(jìn)入
地址: 266000 山*** 國(guó)省代碼: 山東;37
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摘要:
搜索關(guān)鍵詞: 一種 細(xì)胞 角膜 保護(hù) 制備 方法
【權(quán)利要求書】:

1.一種脫細(xì)胞角膜緣保護(hù)液,其特征在于,其成分由5~12g/L透明質(zhì)酸、5~20g/L硫酸軟骨素、3~10g/L低分子右旋糖酐和2.5~5mg/L妥布霉素的PBS緩沖液組成。

2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的脫細(xì)胞角膜緣保護(hù)液,其特征在于,所述脫細(xì)胞角膜緣保護(hù)液的pH值為7.2~7.4。

3.根據(jù)權(quán)利要求1或2所述的脫細(xì)胞角膜緣保護(hù)液,其特征在于,所述脫細(xì)胞角膜緣保護(hù)液的滲透壓為300~400mOsm。

4.利用權(quán)利要求1~3任意一項(xiàng)脫細(xì)胞角膜緣保護(hù)液制備脫細(xì)胞角膜緣的方法,其特征在于,包括以下步驟:

(1)將含前彈力層的新鮮豬角鞏膜緣基質(zhì)密封于所述脫細(xì)胞角膜緣保護(hù)液中,采用高靜壓處理破碎細(xì)胞;

(2)將細(xì)胞破碎后的角膜緣置于添加了去垢劑和核酸酶的所述脫細(xì)胞角膜緣保護(hù)液中進(jìn)行震蕩脫細(xì)胞處理;

(3)將所述脫細(xì)胞后的角膜緣置于所述脫細(xì)胞角膜緣保護(hù)液中漂洗。

5.根據(jù)權(quán)利要求4所述的制備方法,其特征在于,所述高靜壓處理破碎細(xì)胞的條件為:壓力為100~600MPa,高靜壓頻率為2~5次,每次為1~2分鐘,總時(shí)間不超過10分鐘。

6.根據(jù)權(quán)利要求4所述的制備方法,其特征在于,所述去垢劑包括Triton、十二烷基硫酸鈉、十二烷基磺酸鈉中的一種或多種。

7.根據(jù)權(quán)利要求4或6所述的制備方法,其特征在于,所述去垢劑在所述脫細(xì)胞角膜緣保護(hù)液中的濃度為0.2~0.5%。

8.根據(jù)權(quán)利要求4所述的制備方法,其特征在于,所述核酸酶包括DNA酶和/或RNA酶。

9.根據(jù)權(quán)利要求4或8所述的制備方法,其特征在于,所述核酸酶在所述脫細(xì)胞角膜緣保護(hù)液中的濃度為100~2000U/ml。

10.根據(jù)權(quán)利要求4所述的制備方法,其特征在于,所述震蕩脫細(xì)胞處理的條件為:轉(zhuǎn)速100~150轉(zhuǎn)/分鐘,溫度20~30℃,時(shí)間2~4小時(shí)。

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