[發明專利]一種測定魚飼料中姜黃素含量的方法

有效

• 申請號: 201611043767.8
• 申請日: 2016-11-11
• 公開（公告）號: CN106770710B
• 公開（公告）日: 2019-11-15
• 發明（設計）人: 劉永濤;艾曉輝;楊紅;董靖;胥寧;楊移斌;楊秋紅
• 申請（專利權）人: 中國水產科學研究院長江水產研究所
• 主分類號: G01N30/02
• 分類號: G01N30/02
• 代理公司: 42001 武漢宇晨專利事務所
• 代理人: 王敏鋒<國際申請>=<國際公布>=<進入

本發明公開了一種測定魚飼料中姜黃素含量的方法，其步驟：A、取魚飼料于離心管中，加入試劑A，振蕩，超聲，離心；B、轉移提取液，再向原離心管中加入試劑A重復提取一次，合并提取液于125 mL旋轉濃縮瓶中，濃縮至干；C、向旋轉濃縮瓶中加入試劑B復溶旋轉濃縮瓶中的殘渣；D、轉移復溶液至離心管中，氮氣吹干；E、向離心管中加入溶液C和試劑D，振蕩，離心，取下層液體過濾，UPLC?TUV測定，采用魚飼料基質標準曲線計算魚飼料中雙去甲氧基姜黃素、去甲氧基姜黃素和姜黃素的含量。該方法操作簡單、快速、準確、靈敏度高、易于推廣。適于測定魚飼料中雙去甲氧基姜黃素、去甲氧基姜黃素和姜黃素的含量。

技術領域

本發明屬于分析測試領域，更具體涉及一種測定魚飼料中雙去甲氧基姜黃素、去甲氧基姜黃素和姜黃素含量的UPLC-TUV方法，它適用于測定魚飼料中雙去甲氧基姜黃素、去甲氧基姜黃素和姜黃素的含量。

背景技術

姜黃素，別名姜黃色素，包括雙去甲氧基姜黃素、去甲氧基姜黃素和姜黃素，具有保護腸粘膜、抗氧化、抗炎、抑菌、降血脂、保肝、利膽等藥理活性，3種成分的生理活性也有所不同，姜黃素的抗氧化活性大于去甲氧基姜黃素和雙去甲氧基姜黃素，去甲氧基姜黃素降血脂的活性明顯高于姜黃素，雙去甲氧基姜黃素在利膽及對內皮細胞生長的抑制作用方面，較去甲氧基姜黃素和姜黃素活性強。有研究表明，姜黃素在促進魚類生長、提高魚類消化酶活性和抗氧化力、增強免疫功能及改善肌肉品質和魚體色澤方面具有一定作用：在魚飼料中添加姜黃素可顯著提高羅非魚、虹鱒和草魚的抗氧化能力；姜黃素可以促進大黃魚的生長、增強大黃魚皮膚與肌肉的著色；飼料中添加姜黃素可以顯著提高草魚腸道中蛋白酶和淀粉酶的活性，促進魚體對營養物質的吸收；飼料中添加4％～6％的姜黃素還能夠預防魚腸炎病、小瓜蟲病、赤皮病等疾病。由此可見姜黃素作為添加劑在魚飼料中使用具有較好的應用前景和實用性，為有效測定魚飼料中雙去甲氧基姜黃素、去甲氧基姜黃素和姜黃素3種成分各自的含量，建立一種有效的方法測定魚飼料中雙去甲氧基姜黃素、去甲氧基姜黃素和姜黃素的含量是非常必要的。

目前，國內外未見有關魚飼料中雙去甲氧基姜黃素、去甲氧基姜黃素和姜黃素含量測定方法的報道或申請專利。

發明內容

本發明目的是在于提供了一種測定魚飼料中雙去甲氧基姜黃素、去甲氧基姜黃素和姜黃素含量的方法。該測定方法所用試劑價格便宜，操作方便快捷，測定方法的準確性和靈敏度高，分析時間短。適于快速準確測定魚飼料中雙去甲氧基姜黃素、甲氧基姜黃素和姜黃素的含量。

為了實現上述的目的，本發明采用以下技術措施：

一種測定魚飼料中姜黃素含量的方法，其步驟是：

A、魚飼料(通威黃顙魚配合飼料1號)中雙去甲氧基姜黃素、去甲氧基姜黃素和姜黃素采用試劑A(15-30mL)提取，經旋轉蒸發儀(予華YRE2000E)將試劑揮干；

B、再經試劑B(1～10mL)復溶旋轉蒸發后的殘渣，將復溶溶液轉移到一支10mL塑料離心管中置40℃氮吹儀(大森DS-K200型)上氮吹至干，向10mL塑料離心管中加入1mL定容溶液C溶解塑料管中的殘渣；

C、再加入1mL試劑D，渦旋振蕩30s，7000r/min離心5min，將上層液體棄去；

D、用1mL注射器吸取下層液體過0.22μm聚醚砜水系濾頭，過濾液(溶解有雙去甲氧基姜黃素、去甲氧基姜黃素和姜黃素的溶液C，1mL)放置到2mL進樣瓶(Waters，12×32mm，帶蓋)中，超高效液相色譜紫外法(UPLC-TUV)測定。獲得雙去甲氧基姜黃素、去甲氧基姜黃素和姜黃素的色譜圖，通過色譜圖積分得出雙去甲氧基姜黃素、去甲氧基姜黃素和姜黃素的峰面積。