[發(fā)明專利]一種豬多殺性巴氏桿菌病抗原的制備方法及應(yīng)用

在審

• 申請(qǐng)?zhí)枺?/td>: 201611026618.0
• 申請(qǐng)日: 2016-11-11
• 公開（公告）號(hào): CN106692962A
• 公開（公告）日: 2017-05-24
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 肖華春;王成業(yè);汪鑫鑫;李玉梅;王楠楠
• 申請(qǐng)（專利權(quán)）人: 安徽東方帝維生物制品股份有限公司
• 主分類號(hào): A61K39/102
• 分類號(hào): A61K39/102;A61P31/04
• 代理公司: 北京精金石專利代理事務(wù)所(普通合伙)11470
• 代理人: 劉曄

1.一種豬多殺性巴氏桿菌病抗原的制備方法，其特征在于，該方法的操作步驟如下：

（1）、培養(yǎng)基的制備和消毒：領(lǐng)取豬肺疫干粉培養(yǎng)基，按照每次培養(yǎng)10萬毫升/罐的比例加入注射用水進(jìn)行配制，然后在116℃的溫度下，在發(fā)酵罐內(nèi)持續(xù)30分鐘的消毒滅菌，最后冷卻至37℃準(zhǔn)備接種；

（2）、細(xì)菌接種：將上述步驟（1）制得的培養(yǎng)基按照培養(yǎng)基總量的2%接種細(xì)菌種子液，將保存?zhèn)溆玫募?xì)菌種子液2000ml移入無菌室，同時(shí)，按發(fā)酵罐培養(yǎng)基總量加入0.1%裂解血球全血，最后連接接種的各路管道，利用潔凈空氣將菌種壓入發(fā)酵罐內(nèi)；

（3）、細(xì)菌培養(yǎng)：細(xì)菌接種完畢后，37℃靜止培養(yǎng)1小時(shí)，繼續(xù)通氣培養(yǎng)，在通氣培養(yǎng)到7-10小時(shí)內(nèi)向發(fā)酵罐內(nèi)添加一定量的上述步驟（1）所制得的經(jīng)滅菌的新鮮培養(yǎng)基，然后繼續(xù)通氣培養(yǎng)直至活菌數(shù)達(dá)到最高峰，培養(yǎng)結(jié)束，收獲抗原進(jìn)行各項(xiàng)檢測(cè)，2～8℃保存?zhèn)溆谩?/p>

2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種豬多殺性巴氏桿菌病抗原的制備方法，其特征在于，所述步驟（3）在通氣培養(yǎng)至7-10小時(shí)內(nèi)一次性向發(fā)酵罐內(nèi)添加百分比為20%的新鮮培養(yǎng)基。

3.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種豬多殺性巴氏桿菌病抗原的制備方法，其特征在于，所述步驟（3）在通氣培養(yǎng)至7-10小時(shí)內(nèi)分兩次向發(fā)酵罐內(nèi)添加百分比為7-15%的新鮮培養(yǎng)基，優(yōu)選為,培養(yǎng)至7小時(shí)和培養(yǎng)至9小時(shí)時(shí)向發(fā)酵罐內(nèi)添加百分比為10%的新鮮培養(yǎng)基。

4.根據(jù)權(quán)利要求1至3任一所述的一種豬多殺性巴氏桿菌病抗原的制備方法，其特征在于，所述方法制備的抗原可應(yīng)用于疫苗的制造。