[發明專利]葡萄生物防霉保鮮方法

在審

• 申請號: 201611024250.4
• 申請日: 2016-11-17
• 公開（公告）號: CN106720241A
• 公開（公告）日: 2017-05-31
• 發明（設計）人: 李麗梅;劉霞;喬麗萍;龐玲玲
• 申請（專利權）人: 天津捷盛東輝保鮮科技有限公司
• 主分類號: A23B7/152
• 分類號: A23B7/152;A23B7/148;A23B7/154
• 代理公司: 天津盛理知識產權代理有限公司12209
• 代理人: 趙瑤瑤

1.一種葡萄生物防霉保鮮方法，其特征在于：包括葡萄的分選、SO₂熏蒸、防霉劑施用、CA貯藏，步驟如下：

⑴葡萄的分選：

采收成熟度較高，全紅色，并且含糖量14％以上的葡萄，用果剪剔除有機械傷、破損、霉腐變質的果粒，0℃±1℃庫體貯藏間內預冷12h；

⑵SO2熏蒸：

采用SO₂低劑量首次300ppm熏蒸10小時，殺滅田間病原菌，葡萄霉菌量低于100spores/kg；

⑶表面噴施，在葡萄表面噴施生物保鮮劑，生物保鮮劑的配方如下：重量份數

100份無菌水中加入海藻糖1～3份、甘油4～5份、環氧大豆油3～4份和殼聚糖0.2～0.4份，5～10份的幾丁質酶、5～8份的角質酶、8～10份的纖維素酶。

生物保鮮劑復性劑的制備方法：

100份無菌水中加入海藻糖1～3份、甘油4～5份、環氧大豆油3～4份和殼聚糖0.2～0.4份，并500～600r/min攪拌1-1.5小時，使其完全溶解，5～10份的幾丁質酶、5～8份的角質酶、8～10份的纖維素酶，500～600r/min攪拌20～30分鐘混勻，所制備生物保鮮劑置于0℃～4℃條件下保存；

復性劑為：將0.5～0.6份Mg²⁺、0.3～0.5份的Mn²⁺，并用10份的0.1mol/L磷酸緩沖液，充分混勻，調節pH 7.2～7.9，以提升酶活性；使用時活化保鮮劑后噴施于果蔬表面，自然晾干后于適宜溫度、濕度和氣體條件下貯藏。

⑷貯藏：

采用厚度為0.03mm葡萄PVC專用透濕保鮮袋，將保鮮袋扎口于0℃±1℃貯藏；包裝袋內O₂濃度2％～3％，CO₂濃度1％～5％，濕度控制在90％～95％。

2.根據權利要求1所述的葡萄生物防霉保鮮方法，其特征在于：所述生物保鮮劑的制備方法如下：

⑴由蘇云金芽孢桿菌CICC 23702產生幾丁質酶：

采用磁化水代替蒸餾水制備培養基，培養基中加0.8～1.0％的Mg²⁺、0.3％～0.5％的Mn²⁺以及0.2～0.3wt％的幾丁質配成高產幾丁質酶的誘導培養液；在紅光條件下，加入30～40mL的增殖誘導培養基培養4d，復合誘導蘇云金芽孢桿菌高產幾丁質酶，培養液采用超聲頻率為15KHz-20KHz的超聲波進行細胞破碎并純化以敲除幾丁質酶雜基，然后5000r/min低溫離心20min后收集上清液，調節pH5.5～5.8至該幾丁質酶等電點，沉淀提取分離；

⑵由從葡萄中分離的灰霉誘導產生角質酶、纖維素酶

誘導條件：將10⁸spore/mL灰霉菌孢子加5mL霉菌增殖培養基中，其中培養基中加入0.8％～1.2％的角質酶和2.0％～2.5％的纖維素酶以誘導霉菌高產角質酶和纖維素酶，28℃培養4d后，5000r/min冷凍低溫離心10min～20min，以除去菌體和培養基殘渣，取上清液調節上清液pH6.2-6.9至兩酶等電點，沉淀提取生物活性物質角質酶和纖維素酶；

⑶防霉保鮮劑配方：重量份數

100份無菌水中加入海藻糖1～3份、甘油4～5份、環氧大豆油3～4份和殼聚糖0.2～0.4份，并500～600r/min攪拌1-1.5小時，使其完全溶解，5～10份的幾丁質酶、5～8份的角質酶、8～10份的纖維素酶，500～600r/min攪拌20～30分鐘混勻，所制備拮抗菌素防霉劑置于0℃～4℃條件下保存；

⑷保鮮劑使用前首先進行抗菌酶復性

復性加入復性劑，復性劑為：將0.5～0.6份Mg²⁺、0.3～0.5份的Mn²⁺，并用10份的0.1mol/L磷酸緩沖液，混勻，調節pH 7.2～7.9；

所述步驟⑴的誘導培養液成分為：蛋白胨5.0g，牛肉浸膏3.0g，NaCl 5.0g，蒸餾水1L，pH7.0，121℃滅菌20min備用；

所述霉菌增殖培養基配方：馬鈴薯200g，葡萄糖20g，蒸餾水1000mL，121℃滅菌20min。

3.根據權利要求1所述的葡萄生物防霉保鮮方法，其特征在于：所述防霉保鮮劑：復性劑重量分數比為：1-10：100。

4.根據權利要求1所述的葡萄生物防霉保鮮方法，其特征在于：所述生物保鮮劑的應用系統如下：包括庫體貯藏間，高壓空氣發生器，保鮮劑配液罐，一次壓力霧化器，二次壓力噴器，在庫體內的一側放置保鮮劑配液罐，配液罐的出口通過管道連接一次霧化器，高壓空氣發生器通過管道分別給一次壓力霧化器和二次壓力噴器供壓縮空氣，一次壓力霧化器的進液口通過管道與保鮮劑配液罐連接，為一次壓力霧化器提供液體；

在一次壓力霧化器的外部密封安裝一外罩，外罩通過管道連接二次壓力噴器進液口，將一次霧化后的微小液體輸送至二次壓力噴器，作為二次霧化的液體來源，一次壓力霧化器和二次壓力霧化器與現有的壓力霧化器結構相同，本申請首次將其進出串聯，使液體進行二次霧化，得到顆粒更小，分散度更加均勻的粒徑小于1μm的氣相粒子；在庫體另一側連通一個壓力平衡裝置，排氣管端部延伸至水槽中；所述保鮮劑配液罐內放置權利要求1所述的生物保鮮劑。