[發明專利]一種依達拉奉氯化鈉注射液有關物質檢測方法

有效

• 申請號: 201611023869.3
• 申請日: 2016-11-14
• 公開（公告）號: CN108072710B
• 公開（公告）日: 2020-10-02
• 發明（設計）人: 馬利華;趙悅;葉海英;杜柳輝
• 申請（專利權）人: 江蘇正大豐海制藥有限公司
• 主分類號: G01N30/02
• 分類號: G01N30/02;G01N30/34
• 代理公司: 南京天華專利代理有限責任公司 32218
• 代理人: 徐冬濤;競存

本發明主要提供一種高效液相色譜法檢測依達拉奉氯化鈉注射液中有關物質的方法。本方法采用十八烷基硅烷鍵合硅膠或八烷基鍵合硅膠為填充劑，以0.2％～0.4％冰醋酸三乙胺?甲醇為流動相，檢測波長為240～260nm，柱溫為20～40℃，流速為0.5～1.0ml/min，梯度洗脫，可同時檢測依達拉奉氯化鈉注射液中的依達拉奉及有關物質，該方法操作簡捷，靈敏度高，可較好的控制產品質量。

技術領域

本發明屬于藥物分析領域，特別涉及一種強效自由基清除劑依達拉奉氯化鈉注射液中有關物質的檢測方法。

背景技術

依達拉奉(Edaravone，3-甲基-1-苯基-2-吡唑啉-5-酮)是由苯肼和乙酰乙酸乙酯合成的吡唑啉酮類化合物，具有強大的自由基清除作用，其分子量為C₁₀H₁₀N₂O，分子量為174.20，結構式為：

依達拉奉是日本三菱東京制藥株式會社開發的中樞神經系統用藥，于2001年在日本首次上市，可有效減輕腦梗塞后腦組織損傷造成的神經癥狀和功能障礙，臨床上主要用于治療急性缺血性腦卒中。作為第1個新型氧自由基清除劑，具有清除自由基、抑制脂質過氧化及減輕缺血腦細胞、血管內皮細胞、神經細胞的氧化和再灌注損傷的作用，并可阻止腦水腫和腦梗死進展，改善因急性腦梗死所致的神經癥狀、日常生活活動能力和功能障礙。近年來，有關依達拉奉治療肌萎縮側索硬化癥、帕金森病等的臨床研究正在進行中，抗癲癇和抗類風濕性關節炎在臨床實踐中被發現，其對人類多種疾病的有效性說明此藥具有廣闊的開發前景。

研究發現，固體狀態的依達拉奉比較穩定，但其水溶液易發生氧化還原反應而降解，雜質含量的多少一方面影響藥效活性，另一方面可能增加藥物的不良反應；因此依達拉奉氯化鈉注射液中雜質檢查方法，對控制其臨床療效具有重要的意義。

然而，現有國內外文獻關于依達拉奉或其制劑的有關物質研究主要采用HPLC法控制，但國內質量標準中測定有關物質的色譜條件并不完善，不能有效檢出本品的有關物質，難以很好的評價依達拉奉特別是依達拉奉氯化鈉注射液的質量。

發明內容

本發明的目的在于提供一種能夠對依達拉奉氯化鈉注射液中的重要雜質進行含量測定的檢測方法。利用本發明公開的方法，可以科學、便捷的測定依達拉奉氯化鈉注射液中依達拉奉及其重要雜質的含量，方法簡便、準確、重復性好。

供試品溶液濃度的選擇：為了兼顧主成分與雜質含量的測定，必須選擇一個合適的樣品濃度，濃度太小不利于雜質出峰，太大會影響主峰超出峰線范圍。依達拉奉氯化鈉注射液規格為100ml:30mg，當樣品直接進樣時，供試品濃度為0.3mg/ml，峰高約1500，可滿足各雜質檢測的要求。

檢測吸收波長的選擇：分析方法選擇的最初目的是為了同時檢測主成分和可能存在的所有雜質。取依達拉奉及其起始原料(苯肼和乙酰乙酸乙酯)、各已知雜質進行紫外掃描，記錄各組分紫外吸收特征，重疊圖確定吸收波長在240～260nm范圍內，各組分紫外吸收相近，優選244nm。

流動相的選擇：研究發現，現有技術中關于依達拉奉氯化鈉注射液中有關物質主要采用等度洗脫，但等度洗脫條件下以甲醇-冰醋酸三乙胺水溶液為流動相，低比例有機相時部分雜質無法檢出；高比例有機相時雜質1及主藥均受其他雜質干擾，峰形不佳。通過摸索優化發現，不同濃度的冰醋酸三乙胺水溶液可改善峰形，當濃度為0.2％～0.4％時，各雜質及依達拉奉峰形良好；故以甲醇-0.2～0.4％冰醋酸三乙胺水溶液進行洗脫優化，最終確定洗脫梯度，保證本法專屬性良好。

因此，本發明提供的一種依達拉奉氯化鈉注射液中有關物質的檢測方法如下：